道地通管汤对输卵管炎性大鼠输卵管Smad7、Smad2及其黏膜超微结构的研究

作     者：肖璠 

作者单位：广西中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：罗志娟

授予年度：2018年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：输卵管炎性疾病 道地通管汤 Smad2 Smad7 扫描电镜 

摘      要：目的:通过观察道地通管汤对输卵管炎性大鼠输卵管组织形态学的改变,输卵管组织中Smad2、Smad7的表达影响及其黏膜超微结构的变化,来探讨其作用机制,为临床治疗输卵管炎性疾病用药提供实验依据。方法:将80只SPF级雌性未孕SD大鼠随机抽样12只为正常组,余68只以细菌接种法建大鼠慢性输卵管炎性模型,造模后于第5,10,15,20天随机抽取大鼠来观察输卵管变化情况,经组织形态学和病理学观察,以证实造模成功。造模20天后(除去造模死亡的3只,取材5只)将剩余60只大鼠按随机数字表法分为:道地通管汤低、中、高剂量组、模型组、康妇消炎栓组,每组12只。造模后第21天开始灌肠给药,其中正常组及模型组给予生理盐水,康妇消炎栓组给予康妇消炎栓水溶剂,道地通管汤低、中、高剂量组分别予道地通管汤低、中、高三种浓度水煎剂。分别在灌肠第15、30天每组随机选取6只大鼠处死、取材,采用HE染色观察输卵管组织形态学变化和免疫组化技术检测输卵管组织Smad2、Smad7蛋白的表达量,q RT-PCR检测Smad7m RNA的含量变化情况,扫描电镜观察大鼠输卵管黏膜超微结构的变化。结果:(1)经药物灌肠治疗15、30天后通过组织形态学和病理学观察大鼠输卵管情况,与模型组比较,道地通管汤各剂量组和康妇消炎栓组都能不同程度改善模型大鼠输卵管组织形态。(2)给药15、30天时观察各组大鼠输卵管组织中Smad2、Smad7蛋白的表达情况:?与正常组比,模型组的Smad2含量明显增加,Smad7的含量明显减少,差异有显著统计学意义(P0.05)。(4)给药15、30天时观察各组大鼠输卵管黏膜超微结构的改变:正常组大鼠输卵管黏膜表面可见广泛密集的纤毛,模型组见广泛性纤毛脱落,纤毛细胞明显减少且广泛粘连,纤毛变短,稀疏分布且无规律。康妇消炎栓组、道地通管汤高、中、低组可不同程度的改善输卵管纤毛情况。结论:(1)通过免疫组化检测及q RT-PCR检测技术,可发现当炎症加重时,模型大鼠输卵管组织中的Smad2表达量升高,Smad7的表达量减少,而当炎症控制后Smad2表达量下调,Smad7的表达量上调,这说明Smad2、Smad7可能参与了输卵管炎性的建立过程,道地通管汤能有效抑制Smad2表达,促进Smad7蛋白表达上调,道地通管汤的抗炎、抗纤维化作用机制可能与抑制Smad2、促进Smad7有关。(2)经药物灌肠治疗后,通过肉眼和组织切片病理学、扫描电镜观察各组大鼠输卵管组织情况,道地通管汤能够改善大鼠输卵管组织的色泽、水肿、弹性、周围组织粘连情况,以及改善组织炎症细胞的浸润和组织纤维化,改善和修复输卵管黏膜结构,从而恢复输卵管运输功能。且给药时间越长,其作用效果越好,且以道地通管汤高剂量组最为突出。