绞股蓝皂苷对人肝癌和七叶胆苷ⅩⅦ对宫颈癌细胞体外抗癌活性及其机理

作     者：Sayed Sajid Hussain 

作者单位：合肥工业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：魏兆军

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：绞股蓝皂苷(SV) 绞股蓝皂苷ⅩⅦ Hep G2细胞 Hela细胞 凋亡 

摘      要：绞股蓝Gynostemma pentaphyllum富含多种营养成分,具有多种功能,例如治疗血尿、咽和颈部水肿、抗肿瘤等。天然产物的结构不同,它们表现出不同的抗菌和抗肿瘤机制。本论文中,我们调查了绞股蓝皂苷对人肝癌细胞Hep G2、绞股蓝皂苷ⅩⅦ对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用,并进一步研究了其分子机制。主要研究结果如下:（1）绞股蓝皂苷对人肝癌细胞Hep G2的抑制作用及其分子机制。在细胞存活率、细胞周期和诱导Hep G2癌细胞凋亡的基础上,评估了Stevenleaf（SV）的抗癌活性。SV处理诱导Hep G2停滞在G0/G1期,24h和48h的IC50值分别139.82μM和119.12μM;SV处理诱导诱导细胞凋亡并增强细胞内ROS的产生。对于细胞周期相关基因,SV上调p21、p-27、p-53的m RNA表达,下调Cyclin-A、Cyclin D1、Cyclin-E和CDK1/2。SV有效促进细胞受体相关TNF-R1、TRADD1和FADD的表达、下调Caspase-8基因的表达;SV处理后,线粒体途径的Bax、Bak、Cyt c、Apaf1、Caspase 3和Caspase9基因表达量上调,Bcl2、Bcl-xl和Bad基因的表达量下调。SV通过Akt和AMPK激活在Hep G2细胞中诱导m TOR介导的细胞凋亡。（2）绞股蓝皂苷ⅩⅦ对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其分子机制。MTT法用于评估gypenoside ⅩⅦ对Hela细胞的抑制作用,通过Hoechst 33342染色和Annexin V-PI染色鉴定凋亡细胞死亡和凋亡,细胞周期分析用于鉴定细胞四个阶段（G0/G1,S和G2/M期）中的细胞比例。gypenoside ⅩⅦ处理后,细胞的抑制作用随浓度的增加而增加,细胞明显凋亡。与正常细胞相比,G0/G1期的细胞比例增加,而S和G2/M期的细胞比例降低。此外,gypenoside ⅩⅦ处理有效调控死亡受体途径和线粒体途径的基因表达。通过Caspase-8和caspase-9蛋白抑制剂的作用,进一步证明了gypenoside ⅩⅦ诱导Hela细胞的凋亡。上述结果表明绞股蓝皂苷和绞股蓝皂苷ⅩⅦ对癌症细胞具有显著的抑制作用,具有进一步开发为抗癌药或功能性食品的价值。