基于JAK/STAT/SOCS信号通路研究芪石肾舒胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及机制

作     者：唐小玲 

作者单位：西南医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张琼

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：芪石肾舒胶囊 JAK/STAT/SOCS信号通路 糖尿病肾病 作用及机制 

摘      要：目的:通过观察芪石肾舒胶囊对糖尿病肾病大鼠JAK/STAT/SOCS信号通路的影响,探讨芪石肾舒胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及机制。方法:清洁级SD雄性大鼠50只按随机数字表分为对照组、模型组、芪石肾舒胶囊低剂量组（肾低组）及芪石肾舒胶囊高剂量组（肾高组）、缬沙坦组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠予以高脂高糖饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素（STZ）（35mg/Kg）诱导建立糖尿病肾病大鼠模型。对照组、模型组予生理盐水灌胃,其余各组分别予以芪石肾舒胶囊低剂量（1.2g/kg.d）、芪石肾舒胶囊高剂量（2.4g/kg.d）、缬沙坦胶囊（0.034g/kg.d）每日1次灌胃治疗,共8周。观察大鼠一般情况,每2周禁食不禁水12小时后称重并测空腹血糖,并用代谢笼收集尿液检测尿微量白蛋白/尿肌酐（ACR）,每4周检测24小时尿蛋白定量,末次给药后处死大鼠留取血液标本检测肾功,留取肾脏在光镜下观察肾脏形态学改变（HE染色及Masson染色）;免疫组化染色检测P-JAK2、P-STAT3、SOCS1及SOCS3的表达;荧光定量PCR法检测肾组织JAK2、STAT3、SOCS-1、SOCS-3的mRNA表达;Western blot法检测肾组织P-JAK2、P-STAT3、SOCS-1、SOCS-3的蛋白含量。结果:1.血糖、体重变化:与对照组相比,模型组及各治疗组大鼠血糖均明显升高（p0.01）,而体重差异无统计学意义（p0.05）;与模型组相比,各治疗组血糖变化无统计学意义,而体重明显升高（p0.01）,差异有统计学意义;与缬沙坦组相比,肾低组及肾高组血糖差异均无统计学意义（p0.05）,肾低组体重增加,但无统计学意义（p0.05）,而肾高组体重增加,差异有统计学意义（p0.05）;与肾高组相比,肾低组血糖变化无统计学意义（p0.05）,而体重明显降低（p0.05）。***及24小时尿蛋白定量:与对照组相比,模型组及各治疗组治疗前ACR及24小时尿蛋白定量差异均无统计学意义（p0.05）,治疗后均明显增加（p0.01）;与模型组相比,各治疗组ACR及24小时尿蛋白定量均明显降低,差异有统计学意义（p0.05）;与缬沙坦组相比,肾低组ACR及24小时尿蛋白定量升高,但差异均无统计学意义（p0.05）,肾高组ACR及24小时尿蛋白定量减少（p0.05）;与肾高组相比,肾低组ACR及24小时尿蛋白定量升高,但差异无统计学意义（p0.05）。3.尿素氮（BUN）及血肌酐（CREA）指标:与对照组相比,模型组、肾低组及肾高组BUN及CREA均升高,差异有统计学意义（p0.05）,缬沙坦组也升高,但差异无统计学意义（p0.05）;与模型组相比,肾低组BUN升高（p0.01）,而CREA降低,差异无统计学意义（p0.05）,肾高组及缬沙坦组BUN及CREA均明显降低,但BUN差异无统计学意义（p0.05）,而CREA差异有统计学意义（p0.01）;与缬沙坦组相比,肾低组BUN及CREA均明显升高（p0.01）,肾高组BUN及CREA均升高,但无统计学意义（p0.05）;与肾高组相比,肾低组BUN及CREA均偏高,但无统计学意义（p0.05）。4.肾脏病理改变:HE及Masson染色示对照组大鼠肾小球未见明显的萎缩或肿大,无毛细血管基底膜增厚及炎性渗出。模型组肾间质内见不同程度的炎性细胞浸润,以淋巴细胞和中性粒细胞为主,肾间质见少量纤维结缔组织增生及增生的成纤维细胞聚集。肾低组肾间质内炎性细胞浸润偏多,以淋巴细胞为主,并可见较多肾小管上皮细胞严重肿胀变形呈气球样变;肾高组肾间质内炎性细胞浸润及肾小管上皮细胞轻微气球样变较肾低组病变轻微,缬沙坦组病变与肾高组相当。5.免疫组织化学染色:对照组大鼠肾小球系膜区、肾小管间质区细胞p-JAK2、p-STAT3及SOCS1、SOCS3均有少量表达。与对照组相比,模型组及各治疗组P-JAK2、P-STAT3表达相对增多,而SOCS1及SOCS3表达相对减少,但差异无统计学意义（p0.05）,肾低组P-JAK2变化差异无统计学意义（p0.05）,而P-STAT3表达增多;与模型组相比,各治疗组P-JAK2、P-STAT3的表达相对减少,而SOCS1表达相对增加,SOCS3的表达差异无统计学意义（p0.05）;与缬沙坦组相比,肾低组P-JAK2、P-STAT3及SOCS1、SOCS3表达差异无统计学意义（p0.05）,肾高组P-JAK2及P-STAT3的表达效果相当,差异无统计学意义（p0.05）,而SOCS1及SOCS3表达相对增加,但差异无统计学意义（p0.05）;与肾高组相比,肾低组P-JAK2、P-STAT3表达相对增加,而SOCS1、SOCS3的表达