补肾化痰法促进胞饮突发育及调控子宫内膜容受性相关分子改善肥胖PCOS雌性大鼠子宫内膜容受性的效应机制

作     者：陈美佳 

作者单位：成都中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐晓娟

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：补肾化痰法 胞饮突 相关分子 肥胖PCOS模型雌鼠 子宫内膜容受性 

摘      要：目的:本研究观察补肾化痰法调节胞饮突发育及调控子宫内膜容受性相关分子改善肥胖PCOS模型雌鼠子宫内膜容受性机制。方法:采用7～8周龄SD雌性大鼠123只,通过阴道脱落细胞涂片筛选动情周期正常的120只雌性大鼠。随机选20只作为空白对照组的雌性大鼠,其余用来曲唑加高脂乳剂建立肥胖PCOS模型,造模成功后,将模型大鼠随机平均分为补肾化痰拟方高、中、低剂量组、模型对照组、阳性对照组;中药高、中、低剂量组灌服等体积相应浓度补肾化痰拟方中药,阳性对照组予二甲双胍,模型空白组正常对照组灌服等体积蒸馏水。药物治疗21天后称重、取血后杀死动物取材,取卵巢、子宫内膜进行HE染色,电镜下观察胞饮突,Elisa法检测血清E、PROG、T的表达,免疫组织化学法检测PR、ER、整合素αvβ3的表达水平,q PCR法检测雌鼠子宫Cyclin D1m RAN表达。SPSS25.0统计软件处理所得数据。结果:1. 补肾化痰法对肥胖型PCOS雌性大鼠动情及体质量的影响:与空白对照组相比,模型对照组雌性大鼠动情周期紊乱,体质量显著增加(P0.01);与模型对照组相比,中药高剂量组动情周期规律,中药中低剂量组动情周期比较规律,中药各组体质量显著下降(P0.01)。2. 补肾化痰法对肥胖型PCOS雌性大鼠血清性激素的影响与空白对照组相比,模型对照组雌性大鼠PROG、E下降(P0.05或P0.01),T升高(P0.01);与模型对照组相比,中药高剂量组PROG、E上升(P0.05),T下降(P0.05),中药中低剂量组PROG、T、E无统计学意义。3. 补肾化痰法对肥胖型PCOS雌性大鼠卵巢及卵泡发育的影响:与空白对照组对比,模型对照组雌鼠卵巢中的间质纤维组织增生,卵泡颗粒层变薄,卵泡膜细胞层显著增厚,闭锁卵泡数量增多,黄体数量有所减少;与模型对照组比较,补肾化痰复方高剂量组雌鼠卵巢的卵泡颗粒细胞层增厚,闭锁卵泡数量减少,可见不同发育阶段的初级、次级甚至成熟卵泡,黄体有所增加。4. 补肾化痰法对肥胖型PCOS雌性大鼠子宫形态及胞饮突发育的影响:与空白对照组相比较,模型对照组胞饮突处于发育期,发育中的胞饮突,子宫处于发情前期大量子宫内膜上皮细胞变性、坏死,淋巴细胞、腺上皮细胞点状坏死、核固缩,腺体数量显著下降(P0.01)。与模型对照组比较,中药高剂量组胞饮突处于成熟期,其形态与空白组相似,中药中剂量组胞饮突处于发育晚期,大量发育快成熟的胞饮突,中药低剂量组胞饮突处于发育初期,数量多;阳性组处于胞饮突处于发育晚期,有少量的成熟胞饮突和大量发育中的胞饮突中药高剂量组子宫内膜处于发情期子宫内膜增生、固有层水肿,中药低中剂量处于发情前期,淋巴细胞浸润、固有层水肿;阳性组处于发情前期淋巴细胞、中性粒细胞浸润子宫内膜上皮细胞变性、坏死。中药各组腺体个数显著上升(P0.01)。5. 补肾化痰法对肥胖型PCOS雌性大鼠子宫容受性相关分子的影响:与空白对照组相比,模型对照组子宫容受性相关分子整合素αvβ3、Cyclin D1m RNA表达下降(P0.05),PR、ER表达升高(P0.05);与模型对照组相比,中药高剂量组子宫容受性相关分子整合素αvβ3、Cyclin D1m RNA表达升高(P0.05或P0.01),PR、ER表达下降(P0.01或P0.05),中药中低剂量组整合素αvβ3、Cyclin D1m RNA、PR、ER无统计学意义。结论:1.补肾化痰法能够规律肥胖PCOS模型雌性的动情周期,控制大鼠体重持续增加,从而改善PCOS雌性大鼠的肥胖状态。2.补肾化痰法能够纠正肥胖PCOS模型雌性大鼠生殖内分泌紊乱,改善高雄状态,促进卵巢的发育,通过胞饮突、ER、PR、整合素αvβ3等建立良好的子宫内膜内环境,发挥改善子宫内膜容受性的效应。3.补肾化痰法可能通过调节性激素,激活Cyclin D1相关信号通路,发挥改善子宫内膜容受性的机制。