PRMT5抑制剂EPZ015666在视网膜母细胞瘤内的抗肿瘤作用研究

作     者：柳星 

作者单位：南昌大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄国富

授予年度：2020年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：视网膜母细胞瘤 PRMT5 EPZ015666 

摘      要：目的:研究PRMT5基因是否在视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma,RB）内表达上调及其是否有促癌作用,探讨其抑制剂EPZ015666对视网膜母细胞瘤的抗肿瘤作用。方法:本研究首先在细胞水平,以视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）为对照,分别通过real-time PCR和Western blot实验检测PRMT5基因mRNA及蛋白质是否在视网膜母细胞瘤细胞（Y79,WERI-Rb-1）内表达上调;在组织水平,通过免疫组化实验分析PRMT5是否在视网膜母细胞瘤组织内表达上调。进一步通过转染使PRMT5在细胞内表达增加或者降低,检测细胞增殖能力。以多浓度（5μM、10μM、20μM、30μM）的PRMT5抑制剂EPZ015666处理Y79、WERI-Rb-1细胞,对照组加入同等体积的含有DMSO培养液处理,进行一系列研究检测细胞增殖能力:MTT实验、克隆形成实验,流式细胞学分析。Western blotting实验检测细胞内周期相关因子蛋白质表达水平变化。裸鼠皮下成瘤实验在动物体内研究PRMT5抑制剂体内抗肿瘤作用。结果:1、PRMT5在视网膜母细胞瘤内表达上调;2、PRMT5过表达促进Y79细胞的增殖,敲低PRMT5抑制WERI-Rb-1细胞增殖;3、EPZ015666抑制RB细胞的体外增殖;4、EPZ015666调节细胞周期相关因子的表达;5、EPZ015666体内抑制视网膜母细胞瘤的生长。结论:PRMT5在视网膜母细胞瘤细胞内表达上调,并且对视网膜母细胞瘤有促生长作用,PRMT5抑制剂EPZ015666可抑制RB的生长。