坏死性肠炎对肉鸡EGC分泌因子的影响及双歧杆菌抗病效果的研究

作     者：叶丽霞 

作者单位：石河子大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐春生;甘尚权

授予年度：2020年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：肉鸡 坏死性肠炎 EGC 双歧杆菌 GFAP NT-3 IL-6 IFN-ɑ 

摘      要：目的:本试验主要研究了由A型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由A型产气荚膜梭菌引起肠炎肠组织学变化;建立A型产气荚膜梭菌感染模型,试验分为对照组、感染组和预防组;采用免疫组化方法检测三组肠神经胶质细胞分泌因子GFAP、NT-3的表达、用ELISA方法检测三组肠中IL-6、IFN-ɑ炎性细胞因子的表达变化。方法:本实验选择A型产气荚膜梭菌(ATCC13124)作为病原菌;将120只1日龄肉鸡随机分为3组,试验组1是对照组,饲喂基础日粮;试验组2是感染组,饲喂基础日粮,灌服喂1.0×10CFU/mlA型产气荚膜梭菌液1ml;试验组3是预防组,饲喂基础日粮,灌服1.0×10CFU/ml产气荚膜梭菌液1ml,饲喂4%的双歧杆菌粉(活菌数均不低于10CFU/g)。选择7、14、21d,分别从对照组、感染组和预防组随机选取5只鸡,进行采样。取十二指肠、空肠、回肠、盲肠6cm左右,取出其肠道内容物,将肠放入10%甲醛中固定,制作石蜡切片,用HE染色方法检测A型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由A型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎的病理变化;取十二指肠、空肠、回肠、盲肠6cm左右,4%的多聚甲醛固定组织,制作石蜡切片,采用免疫组化方法检测由A型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由A型产气荚膜梭菌引起肉鸡肠炎中肠神经胶质细胞分泌因子GFAP、NT-3的表达;取肠新鲜组织,碾磨离心,采用ELISA方法检测由A型产气荚膜梭菌引起的肉鸡鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎中IL-6、IFN-α的表达变化。结果:1.肠病理变化:对照组鸡肠绒毛比较完整,没有出血现象;感染组肠绒毛结构不完整,绒毛固有层中有明显的出血,绒毛断裂,脱落;预防组肠绒毛比较完整,结构正常。2.肠神经胶质细胞分泌因子GFAP、NT-3的表达:肉鸡肠中GFAP在感染组粘膜上皮、肠腺、固有层、肌层、粘膜层、粘膜下层表达;对照组、预防组在粘膜上皮、肠腺、固有层表达,肌层、粘膜层、粘膜下层弱表达,阳性表达总分感染组高于预防组、对照组,预防组高于对照组。NT-3对照组在粘膜上皮、固有层、肌层、粘膜下层、粘膜层弱表达;感染组在粘膜上皮、粘膜下层、粘膜层、固有层、肌层强表达;预防组在粘膜上皮、固有层、肌层、粘膜下层、粘膜层、肌层表达;阳性表达总分感染组高于预防组,预防组高于对照组。***-6、IFN-ɑ表达变化:肉鸡感染组肠中IL-6表达量高于对照组、预防组,差异极显著(P0.05),几乎在同一水平;肉鸡感染组肠中IFN-ɑ表达量高于对照组、预防组,差异显著(P0.05),几乎在同一水平。结论:在由A型产气荚膜梭菌引起鸡肠炎中,肠神经胶质细胞分泌因子GFAP、NT-3的表达总分高于于对照组、预防组,双歧杆菌预防由A型产气荚膜梭菌引起的肠炎有一点的效果;肠细胞因子IL-6、IFN-ɑ表达量高于对照组、预防组,预防组、对照组的表达量基本在同一个水平,双歧杆菌预防由A产气荚膜梭菌感染引起的鸡肠炎有一定效果,降低了肠道中细胞因子IL-6、IFN-ɑ的表达量,对A型产气荚膜梭菌有抑制作用。