子宫内膜异位症患者HLA-C*07内含子ⅦDNA高甲基化与HLA-C*07 mRNA表达的相关性研究

作     者：张艳敏 

作者单位：大连医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：程静新

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

主      题：子宫内膜异位症 DNA甲基化 人类白细胞抗原 多态性 

摘      要：目的:通过检测子宫内膜异位症患者的在位内膜、异位内膜(病例组)和非子宫内膜异位症的子宫内膜(对照组)的HLA-C07内含子Ⅶ在的DNA甲基化状况,及HLA-C07 mRNA的表达水平,比较各组间存在的差异;目的在于研究HLA-C07内含子ⅦDNA异常甲基化与子宫内膜异位症的相关性,从表观遗传方面进一步探讨子宫内膜异位症的发病机制。方法:收集2017年04月至2018年09月期间于上海市东方医院住院且经病理学诊断确认为卵巢型子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜、异位内膜组织作为病例组;同时间段内与我院门诊或住院接受放环、取环的非子宫内膜异位症的育龄期女性子宫内膜作为对照组。分别提取病例组的异位内膜、在位内膜和对照组的子宫内膜组织DNA,经亚硫酸氢盐处理,将转化的基因组DNA,用亚硫酸氢盐测序法检测HLA-C07内含子ⅦDNA甲基化状况;进一步提取病例组的异位内膜、在位内膜和对照组的子宫内膜组织总RNA,以GAPDH基因作为内参,通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测HLA-C07 mRAN的表达水平。采用SPSS 20.0软件行统计学分析,分别比较病例组在位内膜、异位内膜与对照组之间HLA-C07内含子ⅦDNA甲基化程度的差异及HLA-C07 mRNA表达量的差异;计量资料符合正态分布者,采用单因素方差分析;计数资料,采用ⅹ检验,比较各组间HLA-C07内含子ⅦDNA甲基化率;不符合正态分布者,采用非参数检验;相关性分析采用Spearman相关分析计算HLA-C07内含子ⅦDNA甲基化与HLA-C07 mRNA水平之间的相关系数,以P0.05)。3.子宫内膜异位症HLA-C07内含子Ⅶ甲基化程度与HLA-C07 mRNA表达量的相关性:病例组的在位内膜中,HLA-C07内含子ⅦDNA甲基化程度与HLA-C07 mRNA表达水平密切相关(r=0.843,P=0.009);病例组的异位内膜中,HLA-C07内含子ⅦDNA甲基化程度与HLA-C07 mRNA表达水平密切相关(r=0.746,P=0.034)。结论:子宫内膜异位症患者HLA-C07内含子Ⅶ为DNA高甲基化状态,且调节HLA-C*07 mRNA的表达。HLA-C07内含子ⅦDNA高甲基化可作为早期预测子宫内膜异位症的新的生物标志物。