EPO基因靶向表达在AMD发病和治疗中的作用

作     者：童尧 

作者单位：上海交通大学 

学位级别：硕士

导师姓名：汪朝阳

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

主      题：促红细胞生成素 条件性SOD2基因敲除小鼠模型 年龄相关性黄斑变性 脉络膜新生血管 炎症反应 

摘      要：目的:EPO在干性AMD以及CNV的发生与发展中的作用;检测青光眼患者眼内细胞因子的水平并探讨炎症机制在青光眼中的作用。方法:1)构建scAAV-1载体,携带变异型EPO基因过表达质粒以增强EPO信号;或携带EPO-micro RNA以抑制EPO信号,并建立条件性SOD2基因敲除小鼠模型与CNV小鼠模型,视网膜下注射病毒载体,对视网膜的功能和形态进行检测和评估,从正反两方面评价改变EPO信号对干性AMD与CNV的影响;2)应用流式微球分析技术检测临床上收入的青光眼患者房水内炎症因子的水平,评估炎症因素在青光眼的发生发展中的作用。结果:1)视网膜下注射scAAV1-VMD2-EPOR76E的小鼠眼睛未出现异常损伤;而视网膜下注射scAAV1-VMD2-EPO-miRNA和生理盐水的眼睛出现类似drusen的病变;2)电生理检查也发现,视网膜下注射scAAV1-VMD2-EPOR76E对视网膜起到保护作用,而视网膜下注射scAAV1-VMD2-EPOmiRNA对视网膜存在损害作用;3)视网膜下注射scAAV1-VMD2-EPO-miRNA的小鼠眼内CNV明显小于对照组;4)青光眼组患者眼内TNF-α;IP-10;MCP-1;IL-2;IL-10的水平显著高于对照组患者;此外,IFNg的水平与年龄存在一定的正相关性;女性青光眼患者眼内IP-10;IL-2;IL-5的水平显著高于男性青光眼患者;大部分炎症因子之间都存在正相关性。结论:1)EPO在干性AMD中起到保护视网膜的作用;2)下调EPO信号可以抑制CNV的生长;3)炎症免疫反应参与青光眼的发生与发展。