枣仁安神方在正常和失眠模型大鼠体内的药动学比较研究

作     者：李荣 

作者单位：西北大学 

学位级别：硕士

导师姓名：房敏峰

授予年度：2019年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：枣仁安神方 失眠模型 UPLC-TSQ-MS/MS 血浆代谢 组织分布 

摘      要：枣仁安神方精简于古典名方天王补心丹,由酸枣仁(炒),丹参和五味子(醋)组成,具有补心安神之功效,中医主要用于治疗心肝血虚引起的失眠。单胺类神经递质的异常变化可以作为失眠患者的内源性指标,因此,本文以枣仁安神方中7个有效成分和4个单胺类神经递质为指标,采用UPLC-TSQ-MS/MS方法同步分析。获得的实验结果如下:1.建立了同时测定枣仁安神方中7个有效成分和4个单胺类神经递质在正常和失眠模型大鼠血浆及各组织中的超高效液相色谱-三重四级杆-串联质谱(UPLC-TSQ-MS/MS)方法,方法学考察结果显示,11个成分的线性关系良好,精密度值均小于14.92%,准确度值在﹣18.12%-19.88%以内,提取回收率和基质效应范围分别为73.94%-101.06%和80.06%-105.70%,结果符合生物样品检测要求,建立的方法可适用于测定血浆和各组织中11个成分的含量,并应用于枣仁安神方在正常和失眠模型大鼠体内的药动学比较研究。2.将大鼠分为正常组和失眠模型组,用慢性夹尾刺激结合腹腔注射对-氯苯丙氨酸(PCPA)方法制作失眠模型,每天晨时将同等剂量的枣仁安神方提取液(15 g/kg)灌胃正常和失眠模型大鼠,连续7天,考察7个有效成分的血浆药代动力学及4个单胺类神经递质的变化趋势。研究结果显示,失眠模型大鼠体内7个有效成分的达峰浓度(C max)和血药浓度-时间曲线下面积(AUC)均高于正常大鼠(P0.05);给药后的正常和失眠模型大鼠血浆中,5 min后,去甲肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)的水平变化呈下降趋势,而5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的水平变化呈升高趋势,且与7个有效成分的含量变化趋势相同;相比于正常大鼠,失眠模型大鼠给药后血浆中NA和DA水平的下降程度与5-HT和5-HIAA的升高程度均更强,该结果为后续的枣仁安神方作用机制深入研究提供了支撑作用。3.将枣仁安神方提取液灌胃正常和失眠模型大鼠,组织分布结果表明,正常和失眠大鼠给药后5 min-7 h内,脑组织中的NA和DA水平呈下降趋势,与丹酚酸B的浓度变化趋势相同;5-HT水平呈上升趋势,与斯皮诺素、丹参素、原儿茶醛、五味子醇甲、五味子甲素的含量变化趋势相同;与正常状态对比,失眠状态下的大鼠脑组织中DA水平的降低程度与5-HT水平的升高程度均更高(P0.001);同时5个复方成分在失眠状态下的脑含量更高(P0.05)。另外,模型给药复方组与模型给药阳性药(艾司唑仑)组的对比结果表明,整个采集时间内脑5-HT水平的提升效果方面,阳性药与枣仁安神方无显著差异,该结果为阐述枣仁安神方的物质基础提供了参考。