加味四君子汤对犬消化和免疫机能的作用研究

作     者：夏晓冬 

作者单位：安徽农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吴金节;朱良强

授予年度：2019年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：加味四君子汤 犬 表皮生长因子 生长抑素 消化机能 免疫机能 

摘      要：本试验将党参、白术、茯苓、甘草等8味中药制成加味四君子汤,并添加到犬日粮中,旨在研究加味四君子汤对犬小肠表皮生长因子(EGF)和生长抑素(SS)蛋白表达水平及其mRNA相对表达量、消化吸收功能和免疫功能的影响,以探究不同剂量加味四君子汤对犬消化和免疫机能的作用机理,为其临床应用提供试验依据。选取18只一岁龄比格犬,随机分为3组,每组6只,分别为A组(对照组)、B组(1%加味四君子汤组)、C组(2%加味四君子汤组)。A组犬饲喂基础饲粮,B、C组在基础饲粮中分别添加1%、2%加味四君子汤,试验期14 d。分别在0、7、14 d采集血液,用酶联免疫吸附(ELISA)法检D-木糖含量和干扰素(IFN-γ)、白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平。第14d,全部试验犬处死采集胰腺、十二指肠、空肠和回肠,用ELISA法检测胰腺消化酶活性;免疫组化(IHC)法检测小肠各段EGF、SS和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)蛋白阳性表达水平;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)检测小肠各段 EGF、SS、IgA、IgG、IgM mRNA 相对表达量。结果显示:1.第7、14d,与A、B组相比,C组犬血清D-木糖含量显著增加(P0.05)。2.与A、B组相比,C组犬胰腺中三种消化酶活性均显著升高(P0.05)。3.与A组相比,第7 d,C组犬血清中IFN-y、IL-2、IgA、IgM水平显著升高(P0.05),IgG水平极显著升高(P0.01);第14 d,B组犬血清中IFN-y水平显著升高(P0.05),C组犬血清中IFN-y、IL-2、IL-6、IgM水平显著升高(P0.05),IgA、IgG水平极显著升高(P0.01)。4.与A组相比,B、C组犬小肠各段EGF蛋白阳性表达水平极显著升高(P0.01)。与B组相比,C组犬十二指肠、空肠EGF蛋白阳性表达水平极显著升高(P0.01),回肠中显著升高(P0.05)。与A组相比,B组犬空肠EGF的mRNA相对表达量显著升高(P0.05),回肠中极显著升高(P0.01),C组犬小肠各段EGF mRNA相对表达量极显著升高(P0.01)。与B组相比,C组犬十二指肠、空肠EGF mRNA相对表达量极显著升高(P0.01)。5.与A组相比,B组犬十二指肠SS蛋白阳性表达水平极显著降低(P0.01),回肠中显著降低(P0.05),C组犬小肠各段SS蛋白阳性表达水平极显著降低(P0.01)。与B组相比,C组犬小肠各段SS蛋白阳性表达水平极显著降低(P0.01)。与A组相比,B组犬十二指肠、回肠SS mRNA相对表达量极显著降低(P0.01),空肠中显著降低(P0.05),C组犬小肠各段SS mRNA相对表达量极显著降低(P0.01)。与B组相比,C组犬十二指肠SSmRNA相对表达量极显著降低(P0.01),空肠、回肠显著降低(P0.05)。6.与A组相比,B组犬十二指肠SIgA蛋白阳性表达水平极显著升高(P0.01),空肠、回肠中显著升高(P0.05),C组犬十二指肠、空肠SIgA蛋白阳性表达水平极显著升高(P0.01),回肠中显著升高(P0.05)。与B组相比,C组犬空肠SIgA蛋白阳性表达水平显著升高(P0.05)。与A组相比,B、C组犬小肠各段IgA mRNA相对表达量极显著升高(P0.01)。与B组相比,C组犬十二指肠、回肠段IgA mRNA相对表达量极显著升高(P0.01)。7.与A组相比,B组犬十二指肠、空肠IgG mRNA相对表达量显著升高(P0.05),C组犬小肠各段IgG mRNA相对表达量极显著升高(P0.01)。与B组相比,C组犬空肠、回肠IgG mRNA相对表达量显著升高(P0.05)。与A组相比,B组犬十二指肠、空肠IgM mRNA相对表达量显著升高(P0.05),C组犬十二指肠、空肠IgM mRNA相对表达量极显著升高(P0.01),回肠中显著升高(P0.05)。与B组相比,C组犬十二指肠IgM mRNA相对表达量显著升高(P0.05)。本试验结果表明,加味四君子汤能够改善犬肠道吸收和免疫功能,提高胰腺消化酶活性和体液免疫水平,增强犬消化和免疫机能,且2%加味四君子汤对犬的作用效果明显优于1%加味四君子汤。