基于高通量测序探讨参苓白术散对脾气亏虚型泄泻肠道菌群的影响
作者单位：北京中医药大学
学位级别：硕士
导师姓名：李志红
授予年度：2019年
学科分类：100506[医学-中医内科学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床]
摘 要：目的:稳定的肠道微生态环境对人体的健康发挥了重要的作用。许多疾病的发生都可追溯到肠道菌群的失调,功能性腹泻的发生也与之密切相关。但既往对于功能性腹泻肠道菌群失调的研究多局限于菌群培养的手段,难以获得更为具体的菌群变化。而高通量测序手段的出现填补了这一空白。本次研究希望基于高通量测序的方式,探究功能性腹泻的发生在不同的生物水平肠道菌群的变化,能明确具体菌群对功能性腹泻的影响,同时探究参苓白术散对于功能性腹泻肠道具体菌群的调节作用。本篇论文主要从两部分来论述对于功能性腹泻的认识及研究。第一部分为中医文献综述、参苓白术散治疗功能性腹泻效果的Meta分析和西医文献综述三部分,其中中西医文献综述主要涉及中医学的病因病机、证候与中医治疗和西医对功能性腹泻的现代临床研究进展,包括病因、发病机制及治疗。而参苓白术散治疗功能性腹泻效果的Meta分析则通过文献检索、分析,数据整合方式探讨参苓白术散对功能性腹泻的治疗效果;第二部分是从临床试验来探究菌群变化对功能性腹泻的影响以及参苓白术散对肠道菌群的调节。方法:本次研究收集20例从2018年1月至2018年12月于北京中医药大学东直门医院脾胃科门诊就诊的确诊为功能性腹泻、中医辨证属脾气亏虚的患者作为试验组。健康对照组选择该时间段内在外院体检中心经体检及实验室检查排除其他病史的志愿者共20例。采用随机分组的方法,将试验组随机分为中药组(n=10),空白对照组(n=10)。中药组予参苓白术散治疗,空白对照组予一般非药物治疗。收集试验组治疗前粪便样本与健康对照组粪便样本进行高通量测序,探究具体菌群对功能性腹泻的影响;再收集治疗前后中药组和空白对照组的粪便样本,探究参苓白术散对于肠道菌群的影响。结果:1.试验组患者中,无焦虑或抑郁情绪者为11人,可能焦虑或抑郁者3人,明显焦虑或抑郁者6人;健康对照组中,无焦虑或抑郁情绪者为18人,可能焦虑或抑郁者2人,明显焦虑或抑郁者0人。两组数据经Fisher精确检验,?2=7.992,P=0.014(27)0.05。2.中药治疗后,痊愈0例,占0%,显效4例,占40%,有效4例,占40%,无效2例,占20%,总有效治疗率为80%。对治疗前后中医症状总积分分析发现,治疗前中医症状总积分最高为28分,最低为7分,平均为15.50?7.678分;治疗后中医症状总积分最高为12分,最低为2分,平均为7.00?3.651分。两者经正态性检验,符合正态分布。经配对样本t检验,t=4.283,P=0.002(27)0.01,说明治疗前后中医症状总积分存在显著差异(P(27)0.01)。且对于腹部胀/痛、便溏不爽、情绪抑郁或烦躁易怒、肠鸣矢气、脘腹痞满、食欲不振、自汗症状有很好的缓解效果(P(27)0.05)。3.对于试验组和健康对照组来说,两组在肠道菌群丰度和数量上无明显的差异,但在菌群组成结构上有所不同。在门水平上,健康对照组与试验组相比,Synergistetes(互养菌门)增多;在纲水平上,Erysipelotrichi(丹毒丝菌纲)、Coriobacteriia(红椿菌纲)、Mollicutes(柔膜菌纲)占比试验组要比健康对照组增加;在目水平上,健康对照组Synergistales(互养菌目)明显多于试验组,而试验组Erysipelotrichales(丹毒丝菌目)明显多于健康对照组;在科水平上,相比于健康对照组,试验组的Veillonellaceae(韦荣球菌科)、Erysipelotrichaceae(丹毒丝菌科)占比增加,而健康对照组则是Synergistaceae(互养菌科)、Dethiosulfovibrionaceae增多;在属水平上,Coprococcus(粪球菌属)、Megasphaera(巨球型菌属)在试验组的占比要高于健康对照组。4.对于中药组和空白对照组治疗前后来说,两组都有Lactobacillaceae(乳杆菌科)的变化,但中药组变化更为明显。结合中药组治疗前后临床症状和肠道菌群的结果来看,参苓白术散可能通过调整Lactobacillaceae(乳杆菌科)的数量来改善脾气亏虚型泄泻患者的临床症状。结论:1.功能性腹泻患者与健康对照组,在情绪方面存在明显差异,说明焦虑抑郁情绪与功能性腹泻的发生密切相关。2.对比治疗前后患者临床症状积分变化,说明参苓白术散对于脾气亏虚型泄泻有着较好的治疗效果。3.基于高通量测序可以发现,功能性腹泻患者与健康人群虽然在肠道菌群丰度和数量上没有明显差异,但在菌群的组成结构上仍有不同。不同水平上的差异物种Veillonellaceae、Erysipelotrichaceae、Coprococcus、Megasphaera、Erysipelotrichi、Coriobacteriia、Mollicutes菌群的增多,Syner
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