肠癌小鼠模型的建立及其在药物研究中的应用

作     者：冯晨霖 

作者单位：北京协和医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：蒋建东

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：结直肠癌 动物模型 小檗碱 阿克曼氏菌 

摘      要：天然药物小檗碱在体外经证实具有抗结肠癌细胞增殖的活性,本研究中,为了评价小檗碱的体内抗肠癌活性,我们建立了两类具有良好生物学相似性和可重复性的动物模型。一类是基于免疫缺陷小鼠的肿瘤异种原位移植模型,在该模型中,稳定表达荧光素酶报告基因的人结肠癌细胞系被首先接种于裸鼠皮下,收获皮下瘤,将瘤组织小块包埋缝合于NODSCID小鼠的结肠起始段粘膜,之后利用小动物活体成像化学发光检测观察原位瘤的体内生长情况,模型均一稳定,成功率高;在此基础上我们对小檗碱进行体内药效学评价,结果显示,小檗碱口服给药能够显著抑制移植瘤的生长;此外,通过细胞悬液显微注射,我们还原创性地建立了乙状结肠原位移植瘤模型,其具有很高的生物学研究和应用价值。第二类模型是基于C57小鼠的化学诱导结直肠癌模型,氧化偶氮甲烷-葡聚糖硫酸钠组合被用于诱导小鼠结直肠炎症损伤和肿瘤的发生,利用该模型我们发现,小檗碱能够有效防治动物结直肠癌的发生和进展,尤其是预防给药能显著减少肿瘤的发生,与模型组相比抑制率达到60%-90%,提示小檗碱有潜力用于高危人群肠癌的预防或结直肠癌病人术后复发的预防。值得注意的是,小檗碱给药后荷瘤小鼠的肠道菌群结构发生明显变化,其中阿克曼氏菌的丰度显著上调。将体外培养的阿克曼氏菌给予动物灌胃,发现尽管阿克曼氏菌单独使用未产生明显的肿瘤抑制效应,它与小檗碱联合使用却能够增强小檗碱抗肿瘤的药效,尤其是对于单独用药效果较弱的治疗组,提示阿克曼氏菌的上调可能是小檗碱发挥抗肠癌作用的重要中介机制。