细胞增殖及凋亡在自体动静脉内瘘狭窄发生机制中的研究

作     者：田咏竹 

作者单位：河北医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王保兴

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：自体动静脉内瘘 狭窄 内膜增生 细胞增殖 细胞凋亡 

摘      要：目的:血液透析是终末期肾脏病患者不可或缺的治疗手段。良好功能的血管通路是充分透析的重要保障。其中自体动静脉内瘘(Autogenous Arteriovenous Fistula,AVF)是终末期肾脏病患者血液透析的首选血管通路。但AVF1年通畅率通常仅在60-65%的范围内。已知狭窄是AVF最常见的并发症,有研究发现AVF并发症中,狭窄的发生率高达90%以上,而其中近吻合口狭窄的发生率最高,达71%。AVF狭窄主要是由内膜增生所致。内膜增生的机制方面,目前普遍接受的理论是血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells,VSMCs)增生、迁移,炎症细胞浸润,外膜和内膜中大量的细胞外基质沉积和新生血管生成。Yukihiro Hayakawa等人的研究表明在AVF桡动脉内膜增生中存在细胞增殖与细胞凋亡失衡,而关于AVF静脉段内膜增生中细胞凋亡的研究却很少。本研究的目的是通过检测自体动静脉内瘘静脉段狭窄部分血管壁细胞增殖及凋亡相关的因子PCNA、Bcl-2、Bax的表达,进一步探讨细胞增殖及细胞凋亡在AVF狭窄发生机制中的作用,为AVF狭窄的防治提供理论证据。方法:收集河北医科大学第三医院2017年11月至2018年11月终末期肾脏病患者行AVF成形术及重建术术中废弃静脉血管组织:1)留取行AVF重建术患者狭窄及邻近狭窄段的非狭窄血管组织分别设为实验组A(n=10)及实验组B(n=10);2)留取首次行AVF成形术术中需结扎静脉远心端血管组织设为对照组(n=10)。用苏木素-伊红染色(HE)方法观察血管组织形态学变化,免疫组织化学染色方法检测各组血管壁PCNA、Bcl-2、Bax的表达。所得实验数据采用SPSS 21.0统计软件进行分析,结果用均数±标准差(x±s)表示,P0.05)。HE染色:光镜下观察实验组A及实验组B内膜及中膜可见不同程度增厚,内膜增厚程度较中膜显著,实验组A内膜增厚较实验组B明显,且实验组A内膜增厚不均匀,部分凸向管腔,管腔变窄;实验组B内膜增厚程度相对较小,未见明显凸出管腔,管腔不窄。对照组内膜无明显增厚。免疫组织化学染色:应用Image profession plus 6.0图像分析软件对图像进行光密度分析。PCNA在实验组A呈强阳性表达(58.37±20.76),与实验组B(32.78±8.65)及对照组(10.94±2.30)相比,差异具有显著性意义(P均0.05)。Bax在对照组呈弱阳性表达(10.06±2.20),实验组与对照组相比,差异均具有显著性意义(P均0.01)。Bax/bcl-2比值试验组A(0.71±0.21)与试验组B(1.09±0.36)相比,差异具有显著性意义(P0.05)。结论:AVF狭窄是AVF成熟后失功的主要原因,与血管内膜增生相关。细胞增殖与细胞凋亡均参与内膜增生的发生。AVF建立后细胞增殖与凋亡均增加,内膜增厚,血管良性重塑,内瘘成熟可用于血液透析。当细胞增殖进一步增加,而细胞凋亡相对减弱,内膜过度增厚,血管恶性重塑,进而导致内瘘狭窄。