二株Streptomyces diastaticus活性代谢产物及其抑制病原菌机制初探

作     者：胡林芳 

作者单位：云南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李一青

授予年度：2019年

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

主      题：放线菌 次生代谢产物 分离纯化 抑菌活性 

摘      要：放线菌是微生物中一类重要的菌群,其次级代谢产物结构类型丰富,具有抗细菌、抗真菌、抗肿瘤、免疫抑制剂等多种生物活性,是微生物药物的重要来源。本论文通过对17株放线菌进行筛选,得到了具有良好抑菌活性且代谢产物化学成分丰富的两株放线菌菌株YIM PH20095和YIM PH20246,进行后续次生代谢产物及抗真菌活性机制研究。通过16S rRNA基因序列分析,两株放线菌均归属为Streptomyces diastaticus ***。采用色谱分离技术,从菌株YIM PH20095的发酵上清液中得到12个化合物,通过质谱和核磁共振数据,确定它们的结构分别为:8-hydroxyphenazine-1-carboxylic acid、2,5-piperazinedione,6-[(4-hydroxyphenyl)methylene]-1-methyl-3-phenylmethylene、newphenazine A、newphenazine B、9-methoxyphenazine-1-carboxylic acid、methyl benzoate、newphenazine C、1-methoxyphenazine、1,6-phenazinedicarboxylic acid、newphenazine D、newphenazine E和newphenazine F,其中化合物newphenazine A-F是未见文献报道的新化合物。从菌株YIM PH20246的发酵上清液中分离纯化得到7个化合物,通过质谱和核磁共振数据,确定它们的结构分别为:1-hydroxyphenazine、newphenazine G、6-carbamoylphenazine-1-carboxylic acid、newphenazine H、7-hydroxy-6(methoxycarbonyl)phenazine-1-carboxylic acid、phenazine-1-carboxamide和6-hydroxyphenazine-1-carboxylic acid,其中化合物newphenazine G-H是未见文献报道的新化合物。以4株三七根腐病原真菌及5株常见病原细菌为指示菌,测定了所得单体化合物的抑菌活性。19个单体化合物对测试病原菌具有不同程度的抑菌活性,其MIC值的范围在8-512 μg/mL之间。此外,采用生长速率法和孢子萌发法,对菌株YIMPH20095的粗提物拮抗黄瓜萎蔫病原真菌的作用机制进行了初步研究。