猪源纤维蛋白原制剂处方及其冻干工艺研究

作     者：吴庆荣 

作者单位：广东药科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李健

授予年度：2019年

学科分类：100702[医学-药剂学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：猪源纤维蛋白原 Box-Behnken设计 粘合力 孔隙率 退火 

摘      要：纤维蛋白原是由肝脏及血管内皮细胞合成分泌血浆的一种6对多肽链构成的大分子糖蛋白化合物,是血浆中重要的一种凝血因子,与凝血酶结合具有止血、封闭和粘合等作用。另外,纤维蛋白原常作为军事储备止血药,纳入国家应急储备。但由于人血浆采集提取的高昂,加上国内仅有少数几家血液制品生产单位,导致纤维蛋白原制剂在临床上处于供不应求的状态,且原料安全性和制剂性能的临床要求性需进一步提高。因此,猪源纤维蛋白原作为一种新型的动物源性纤维蛋白原,受到广泛关注。因为它不仅可以防止病毒传播的危险性,而且可以极大地降低生产成本。本课题研究利用一种新的全密闭无菌技术从健康猪采集血浆,将获取的猪血浆来开发纤维蛋白原制剂,并选取合适的保护剂辅料和冻干工艺以提高猪源纤维蛋白原制剂性能和质量,并节约成本。研究内容:1、研究和筛选出适合猪源纤维蛋白原制剂保护剂辅料,结合文献、专利和单因素实验选取对制剂性能影响较大的4种保护剂,利用响应面Box-Behnken实验设计对其进行优化分析。2、通过电阻测定法测定产品溶液的共熔点及共晶点,进行预冻温度、时间、退火等研究,并采用Micro-CT技术、扫描电镜(SEM)和圆二色谱等表观分析仪器,探究猪源纤维蛋白原冻干制剂微观结构属性和理化性质,优化调整猪源纤维蛋白原制剂冻干工艺以提高产品质量。3、通过小试放大制备三批产品,对产品复溶后稳定性和加速稳定性进行实验研究。研究成果:1、通过Box-Behnken响应面法分析可知,4种保护剂的影响显著性顺序:蔗糖含量精氨酸含量白蛋白含量氯化钠含量。优化设计得到最优配方比:蔗糖含量17.96 g·L、精氨酸含量4.85 g·L、氯化钠含量3.95 g·L、白蛋白含量3.79 g·L,此时猪源纤维蛋白原制剂复溶时间和粘合剂的体力学性能较佳。2、通过电阻法测定产品溶液共晶点和共熔点:-16℃和-12℃。工艺研究筛选得出Fg制剂预冻的合适温度为-45℃,并对预冻时间进行比较,确定预冻时间为3 h。工艺创新点在于:利用扫描电镜、Micro-CT等表观分析仪器来探讨冻干制剂固体微观结构属性和理化性质,为选择合适的预冻方式提供重要帮助;同时实验研究证明可在冻干过程中增加退火和掺气操作,优点在于:退火可改善药品结构不均匀性,掺气可减少残留含水量,缩短冻干时间。3、对猪源纤维蛋白原冻干制剂进行复溶后稳定性和加速试验研究表明:产品复溶后置37℃水浴中保温1 h内溶液中无凝块或纤维蛋白析出,3批小试产品在加速试验研究下各项指标均符合规定。