孕期及哺乳期母鼠邻苯二甲酸酯类暴露对仔鼠呼吸道过敏的影响

作     者：吕俊锋 

作者单位：锦州医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：程晓萍

授予年度：2019年

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：DEHP OVA 肺组织 致敏反应 Th2型细胞因子 白细胞介素-33 

摘      要：目的本研究通过邻苯二甲酸酯类(DEHP)对孕期及哺乳期Wistar大鼠进行染毒,探讨DEHP母代暴露对子代肺部产生过敏性反应的影响,为了解DEHP的免疫毒性及儿童哮喘的发病机制提供一定依据。方法将18只健康的2月龄雌性Wistar大鼠进行适应性喂养,分成3个不同剂量组,从出现妊娠反应0天(GD0)起,对各组孕鼠分别给予0、30和300 mg/(kg?d)DEHP至仔鼠出生后21天(PND21)断乳,建立母体DEHP暴露模型。待仔鼠出生后,不同剂量组各笼母鼠选取1只仔鼠在PND21、PND28进行卵清白蛋白(OVA)腹腔注射致敏并在PND32、PND33和PND34连续滴鼻致敏激发,在PND35天,对致敏仔鼠与未致敏仔鼠进行共同取材,包括肺泡灌洗液及肺组织。运用细胞计数法对肺泡灌洗液中的炎症因子以及嗜酸粒性细胞数目进行统计学分析,通过ELISA检测法,对肺泡灌洗液中Th2型细胞因子白细胞介素(IL-4、IL-5、IL-13)的分泌情况进行检测,对肺组织进行HE及PAS染色观察肺组织过敏性炎症病理变化;通过免疫组化的方法,对上皮衍生因子IL-33的表达情况进行观察。结果1、肺泡灌洗液中,与对照组比较,DEHP0+OVA组总炎症细胞以及嗜酸性粒细胞数目上升为(131.500±25.548)×10、(32.000±10.079)×10(P0.05)、(30.026±2.756)pg/mL(P0.05)、(18.068±1.497)pg/mL(P0.05)、(32.377±3.739)pg/mL(P0.05)、(20.168±0.939)pg/mL(P0.05)。3、肺组织病理观察显示,单纯DEHP暴露组仔鼠肺组织没有明显的过敏性炎症反应,而各DEHP+OVA组仔鼠肺组织有较明显的过敏反应且随着DEHP剂量加重而加剧。4、免疫组化显示DEHP单纯暴露组IL-33表达无明显增加,而DEHP+OVA各组IL-33表达量增加且有一定的剂量-反应关系。结论1、孕期及哺乳期DEHP的暴露对子代肺部产生炎性致病作用。2、DEHP经OVA致敏后,具有促进嗜酸粒性细胞、炎症细胞、Th2细胞以及IL-33表达作用。