新西兰兔在SPF和常规选育环境下免疫特点差异研究

作     者：王明君 

作者单位：山东农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：樊新忠

授予年度：2019年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：新西兰兔 普通环境 SPF环境 血液生理生化指标 TLR4 免疫指标 

摘      要：在当前的家兔养殖业中,由革兰氏阴性菌引起的细菌性疾病对家兔养殖造成了巨大的困扰。虽然抗生素是一种良好的药物治疗方法,但是也有很多不足,比如药物残留和耐药性增加,所以提高家兔自身免疫力和抗病力是我们必须要解决的问题。有一些研究发现,环境会对生物机体的免疫力产生影响,所以不同选育环境的同一种兔子之间的免疫力可能也有所差异。已有大量研究证明遗传因素与兔的免疫力之间的影响机制,但环境因素如何对兔的免疫力造成影响我们却知之甚少。LPS是革兰阴性菌细胞壁的重要组成成分,注射LPS可以引起动物机体与革兰阴性菌感染相似的生理与病理过程。TLR4属于I型跨膜受体,是革兰阴性菌及其LPS识别的主要受体,它介导LPS免疫应激。本试验选取青岛康大兔业连续培育9年的45日龄普通选育环境新西兰兔和SPF选育环境新西兰兔各24只作为试验对象来研究两种环境下选育对新西兰兔免疫特点的影响。主要试验结果如下:(1)对两种环境下选育的新西兰兔血液生理生化指标进行分析,结果表明:普通环境选育下血液中的白细胞(P0.05),均在刺激后3h时心率显著升高。(3)LPS刺激后两种环境选育下新西兰兔ELISA指标差异研究本试验对8项获得性免疫指标进行检测,分别包括IgA/IgM/IgG、C-反应蛋白(CRP)、结合珠蛋白(HPT)、主要急性期蛋白(MAP)、溶酶菌(Lys)和自然杀伤性细胞(NK)。LPS刺激后6h普通环境选育下新西兰兔血液IgG浓度显著高于SPF环境中(P0.05),其余指标无显著差异。LPS刺激后,除主要急性期蛋白,其余指标浓度均显著升高,其中IgA、IgM、CRP、HPT在刺激后3h浓度达到最高。(4)LPS刺激后两种环境选育下新西兰兔TLR4通路基因表达状况差异研究LPS刺激后,TLR4通路的关键节点基因及下游细胞因子(TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κB、TRIF、IRF7、IL-2、TNFa)的表达量显著高于刺激前,基本在3h时表达量已经达到最高峰,随后逐渐减降低。在LPS刺激后3h时普通环境TLR4的表达量显著高于SPF环境(P0.01),说明普通环境选育的新西兰兔抵抗力可能较高。LPS刺激后,SPF环境选育新西兰兔在3h、6h时TRAF6的表达量显著增高,并显著高于普通环境选育新西兰兔,普通环境选育新西兰兔TRAF6表达量无明显变化。LPS刺激后普通环境选育下新西兰兔NF-κB mRNA表达量增加并在3h和6h时显著高于SPF环境,SPF环境NF-κB mRNA表达量无明显变化。综上所述,普通环境与SPF环境选育下新西兰兔的部分血液生理生化指标、ELISA指标、LPS刺激后TLR4通路基因表达水平存在差异,说明不同等级环境下选育对新西兰兔免疫特点产生影响,为研究基因环境相互作用对免疫特点的影响提供理论基础。