维药阿里红活性成分的导向分离及抗病毒活性研究

作     者：阿依姑丽·买买提明 

作者单位：新疆农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：赛福丁·阿不拉;李建军

授予年度：2017年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：阿里红 抗病毒 新城疫病毒 鸡胚成纤维细胞 硫酸化修饰 硫酸多糖 

摘      要：本研究首先以新城疫病毒为对象,对维吾尔药阿里红各成分进行活性导向分离,寻找具有抗新城疫病毒作用的活性成分,并进行分子修饰,检测修饰前后的体内外抗病毒作用,筛选出效果更好的分子修饰物。主要结果如下:1)用水煎醇沉法提取多糖、超声辅助法提取多酚、浸提法提取黄酮、超生辅助法提取生物碱、水蒸气蒸馏法提取挥发油并测定含量。多糖含量和得率分别为63.80%、1.27%,多酚含量和得率分别为19.00%、1.82%,黄酮含量和得率分别为21.00%、9.11%。生物碱含量和得率分别为25.40%、21.77%,挥发油含量和得率分别为60.40%、2.00%。2)阿里红各活性成分体外抗新城疫病毒作用的研究结果显示,各成分均有抗病毒活性,其中多糖的抗NDV活性较好,对NDV的直接杀灭作用及抑制作用强于对NDV的阻断作用。3)粗阿里红多糖的纯化及硫酸化修结果表明:(1)大孔树脂D900型的脱色效果最佳,多糖的得率及含量分别为16.15%、69.53%。SephadexG-100葡聚糖凝胶柱纯化结果显示,多糖经过SephadexG-100出现一个糖峰,得率为10%。(2)FAP分别设定修饰条件,得到三种硫酸化多糖sFAP、sFAP和sFAP,经红外光谱鉴定多糖硫酸化修饰成功。4)cFAP、cFAP及三种硫酸化修饰物体外抗NDV作用研究表明,上述药物均有抗病毒作用,其中cFAP的抗病毒作用强于cFAP,硫酸化多糖sFAP抑制作用(80.44%)和阻断作用(77.31%)抗病毒效果强于其余两种修饰多糖,sFAP的直接杀灭作用强于其余两者,因此sFAP是抗病毒效果较好的多糖。5)cFAP、sFAP对鸡新城疫的疗效比较研究结果表明,cFAP、sFAP均能提高并能延长机体的抗体水平,其中sFAP组保护率显著高于cFAP组,达到30.2%,痊愈率也显著高于cFAP组,达13.4%。硫酸化多糖的死亡率低于未硫酸化多糖,而硫酸化多糖的保护率高于未硫酸化的多糖,再次说明硫酸化可以提高多糖的抗病毒活性。