新型黄龙病防治技术对砂糖桔药食两用品质影响研究

作     者：李智明 

作者单位：广西医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：冯洁

授予年度：2019年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：砂糖桔 黄龙病 有机磷农药 重金属 微生物 

摘      要：目的:研究新型黄龙病防治技术对砂糖桔果实药用和食用品质、以及对生态土壤性质的影响,以说明此防治技术对砂糖桔作为药用和水果食用两方面品质是否有影响。方法:1.优化砂糖桔及其生态环境下土壤中敌敌畏、灭线磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、倍硫磷、甲基硫环磷、硫环磷共10种有机磷农药的提取分离技术,应用建立气相色谱法测定它们的残留量。以乙腈为溶剂、超声方法提取残留的农药,水果样品不需要过柱净化,土壤样品需要经过弗罗里矽层析柱进行净化处理。2.砂糖桔及其生态环境下的土壤测定铅、铬、镉、砷、汞5种重金属的提取方法,应用建立的电感耦合等离子体质谱法测定它们的含量。样品使用微波消解法,果实样品使用8 mL硝酸和2 mL过氧化氢进行微波消解,土壤样品使用9 mL硝酸、2mL过氧化氢和4 mL氢氟酸进行微波消解。3.运用平板计数法测定砂糖桔黄龙病防治不同次数与未经防治的生态环境下土壤中菌落总数。4.对果皮中橙皮苷的提取工艺参照《药典》方法进行重现性探讨,用索氏提取的方法,先用石油醚回流除去挥发油等干扰紫外吸收等物质,再用甲醇回流提取橙皮苷。应用用高效液相色谱法测定其中橙皮苷的含量。结果:1.应用优化的提取方法可充分提取机磷农药残,谱学技术测定砂糖桔及其生态环境下土壤样品中的含量,气相色谱法检出限在0.0003～0.003 mg/kg之间,线性相关系数均大于0.9990,在高、中、低三个浓度添加标液的回收率在85.13～109.3%之间,相对标准偏差为0.08～2.98%。此方法应用于样品提取及分析,有机磷农药在水果样品中均未被检出;土壤样品有八种机磷农药均未被检出,只检出毒死蜱和乐果。2.应用优化的提取方法可充分提取重金属,ICP-MS法测定砂糖桔及其生态环境下的土壤中铅、铬、镉、砷、汞5种重金属残留,该方法的检出限为0.0003～0.003 mg/kg,线性相关系数均大于0.9978,在高、中、低三个浓度中添加标准液的回收率在为80.70～107.4%之间,相对标准偏差为0.38～3.0%。此方法应用于样品重金属提取及分析,结果通过对比分析发现,使用新型黄龙病防治的砂糖桔及其生态环境下土壤样品重金属含量均未超出国家标准规定限量。3.平板计数法测定砂糖桔黄龙病防治下生态环境中土壤菌落总数,同一个果园不同防治次数,其生态环境中土壤的菌落总数基本相同,没有显著性差异,说明砂糖桔黄龙病新型防治技术对土壤菌落总数影响不大。4.高效液相色谱法测定砂糖橘果皮中的橙皮苷,其含量≥3.5%,符合药典陈皮中橙皮苷含量≥3.5%的规定。结论:农药、重金属、橙皮苷的提取方法均达到提取样品要求,提取充分、高效、简单、易行;所建立测定砂糖桔及其生态环境下土壤中有机磷农药残留的气相色谱法,操作简单,实际应用效果好,检出限低,回收率比较好,水果和土壤中有机磷农药残留检测可以参考该测定方法;所建立的ICP-MS法测定砂糖桔及其生态环境下土壤重金属残留,分析速度快,线性范围宽,灵敏度高,可以对多种元素同时测定,比较适用水果和土壤的中重金属元素的检测;应用平板计数法测定土壤中菌落总数,方法简便易行,可以应用于土壤菌落总数的检测;参照药典高效液相色谱测定砂糖桔果皮中橙皮苷的含量,同样适用于本实验研究。实验结果表明,经过新型黄龙病防治后果实中有机磷农药残留符合食品安全国家标准GB研究2763-2016相关规定;新型黄龙病防治技术对柑橘属果实作为药食两用的重金属残留,符合食品安全国家标准GB 2762-2017中相关规定;果皮橙皮苷含量都大于等于3.5%,符合中国药典陈皮中橙皮苷含量测定限量要求。作为环境污染方面,经过新型黄龙病防治后,生态环境土壤中有机磷农药残留在食品级标准规定范围内;土壤中重金属残留符合国家土壤环境质量标准GB 15618-1995相关规定,土壤中菌落总数无显著性差异。因而,新型黄龙病防治技术对砂糖桔药食用品质没有影响,可以推广应用,保障果农利益。