百合水煎液对麻黄素致损小鼠肺组织的保护作用
作者单位:西北师范大学
学位级别:硕士
导师姓名:俞诗源
授予年度:2016年
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
主 题:麻黄素 百合水煎液 小鼠 肺 组织结构 抗氧化物酶 免疫组织化学
摘 要:目的:通过给小鼠腹腔注射递增剂量的麻黄素溶液和灌胃百合水煎液,检测小鼠体重、脾指数、胸腺指数、肺指数、血浆MPO和肺组织抗氧化物酶活性、组织结构、相关特异蛋白表达的变化,探讨麻黄素对小鼠肺组织的毒性影响和百合水煎液对麻黄素致小鼠肺组织损伤的保护作用。方法:选出生10 d的昆明小鼠90只,随机分为对照组、麻黄素组和百合组。麻黄素组和百合组采用递增剂量2.0 g/L、4.0 g/L、6.0 g/L麻黄素溶液连续腹腔注射15 d,每次注射0.2 mL(每天两次),注射麻黄素1 h后,百合组再灌胃0.2 mL百合水煎液,麻黄素组灌胃等量的生理盐水,对照组腹腔注射和灌胃等量的生理盐水。在实验5 d、10 d和15 d时,处死各组小鼠10只,称量小鼠体重和脾、胸腺、肺重量,计算脏器指数。用比色法检测小鼠肺组织SOD、CAT、GSH-Px活性和MDA含量及血浆MPO活性,用石蜡包埋法和HE染色法观察小鼠肺组织结构的病理变化,用免疫组织化学法检测小鼠肺组织Caspase-3、c-Fos、Bax、NF-κB蛋白表达量的变化。结果:1、百合水煎液对麻黄素致损小鼠体重和脏器指数的影响。与对照组相比较,麻黄素组小鼠体重、脾指数、胸腺指数均降低,肺指数升高(P0.01或P0.05)。与麻黄素组相比,百合组小鼠体重、脾指数、胸腺指数均升高,肺指数降低(P0.05)。2、百合水煎液对麻黄素致损小鼠肺组织抗氧化物酶活性的影响。与对照组相比较,麻黄素组小鼠肺组织SOD、CAT、GSH-Px活性,5 d时暂时升高,10 d、15 d时显著降低(P0.01或P0.05)。MDA含量5 d时暂时降低,10 d、15 d时升高(P0.01或P0.05)。与麻黄素组相比较,百合组小鼠肺组织SOD、CAT、GSH-Px活性升高,MDA含量降低,10 d、15 d时差异显著或极显著(P0.01或P0.05)。3、百合水煎液对麻黄素致损小鼠肺组织结构的影响。对照组小鼠肺组织结构完整,各级支气管及肺泡清晰可见。麻黄素组小鼠肺组织病理损伤明显,肺泡结构紊乱,肺泡上皮细胞出现局部降解、脱落现象。百合组小鼠肺组织损伤有明显改善,肺泡上皮脱落减少。与对照组相比较,麻黄素组小鼠肺泡直径和肺泡隔厚度增大,RAC明显减小,10 d、15 d时差异极显著(P0.01)。与麻黄素组相比较,百合组小鼠肺泡直径和肺泡隔厚度均有减小,RAC增大,10 d、15 d时差异显著或极显著(P0.01或P0.05)。4、百合水煎液对麻黄素致损小鼠血浆MPO活性的影响。与对照组相比较,麻黄素组小鼠血浆MPO活性升高,差异显著(P0.01或P0.05)。与麻黄素组相比较,百合组小鼠血浆MPO活性降低,15 d时差异显著(P0.05)。5、百合水煎液对麻黄素致损小鼠肺组织Caspase-3、c-Fos、Bax、NF-κB蛋白表达的影响。与对照组相比较,肺组织Caspase-3、c-Fos、Bax、NF-κB蛋白阳性表达的平均光密度值明显增大,染色加深(P0.01或P0.05)。与麻黄素组相比较,百合组小鼠肺组织Caspase-3、c-Fos、Bax、NF-κB蛋白阳性表达的平均光密度值明显减小,染色减弱(P0.01或P0.05)。结论:1、麻黄素影响小鼠体重和脏器指数。麻黄素增强小鼠兴奋性和活动量,干扰小鼠各组织的正常发育,引发炎症反应,降低机体免疫功能。2、麻黄素影响小鼠肺组织抗氧化物酶活性。低浓度的麻黄素诱导机体产生免疫防御,促进抗氧化物酶相关基因的高表达,减少MDA的积累。随着注射麻黄素时间和浓度的增加,抗氧化物酶的合成过程被抑制,机体的抗氧化酶系统被破坏。3、麻黄素影响小鼠肺组织结构。导致小鼠肺组织单位面积内肺泡数量减少,肺呼吸面积降低,肺内氧的利用率减缓,进而影响肺组织的功能。4、麻黄素影响小鼠血浆MPO活性和肺组织Caspase-3、c-Fos、Bax、NF-κB蛋白的表达。麻黄素增加小鼠血浆MPO活性,增强肺组织Caspase-3、c-Fos、Bax、NF-κB蛋白的表达,这表明麻黄素能促进小鼠机体发生炎症反应,增强肺组织细胞凋亡,导致肺组织损伤。5、百合水煎液对麻黄素致小鼠肺组织损伤有保护作用。百合含有多种微量元素和活性物质,能够提高机体免疫力,平衡抗氧化物酶系统,调节机体代谢,改善体循环和肺循环,抑制受损组织中的炎症反应和细胞凋亡,具有抗疲劳及中枢镇静的作用。百合组小鼠的各项指标趋于对照组,说明百合水煎液可提高麻黄素小鼠的免疫功能和抗氧化物酶活性,减弱机体炎症反应和肺组织细胞凋亡,修复麻黄素对小鼠肺组织结构的损伤。