Integrin β1影响小鼠皮肤创面修复过程中上皮化及收缩的在体研究

作     者：刘远航 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吴毅平

授予年度：2017年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：integrinβ1 上皮化 创面收缩 创面愈合 

摘      要：目的研究应用integrinβ1(整合素β1)拮抗剂拮抗integrinβ1受体建立小鼠皮肤创面模型,研究integrinβ1对皮肤创面愈合的影响。方法10-12周龄的C57BL/6J小鼠50只,小鼠背部备皮。采用随机数字表法选取一侧为缓释胶囊渗透压泵置入侧,沿小鼠背部正中线同双耳根部连线交点为起点向尾部分别标记1.5 cm、4 cm和5 cm处,并于1.5 cm外左右任意侧做全层皮肤切口皮下置入缓释胶囊渗透压泵,缝合切口,其中实验组泵预装integrinβ1拮抗剂,对照组泵预装生理盐水。于术后2天小鼠下背部中线标记的4cm和5cm间正方形区域内切取直径8 mm圆形全层皮肤,术后每只小鼠独笼饲养,每日拍照记录,于术后第3天、5天、7天及14天取材创面周围皮肤组织。采用大体观察和组织学检测方法对术后创面愈合情况进行分析,比较各组创面修复过程中的修复指标。对数据行方差分析及独立样本t检验。结果相机拍摄创面愈合过程,发现各观察时间点实验组均慢于对照组的愈合,计算术后14天创面平均愈合率实验组(95.43±1.13)%明显低于对照组(99.60±0.402)%,其差异有统计学意义;HE染色可见术后3天时实验组较对照组再生上皮更薄和肉芽组织量更少,且实验组创缘组织水肿明显,炎性细胞浸润量少,在创缘边有角质细胞堆积,向创面中心迁移缓慢,而对照组创缘水肿程度轻,炎性细胞量相对较多,角质细胞向创缘中心由多到少呈楔形分布,计算14天时两组创面新生表皮厚度实验组(11.66±0.38)um薄于对照组(6.89±0.05)um,差异有统计学意义;免疫荧光检测术后3天小鼠创面周围正常皮肤组织中的integrinβ1含量,实验组明显低于对照组,差异有统计学意义;Masson染色检测创面胶原沉积结果提示14天时实验组的胶原沉积量明显少于对照组,差异有统计学意义;免疫组化染色检测创面中integrinβ1的分布,提示早期3天、5天实验组中表达量少,而对照组高表达且在创缘边呈楔形分布,7天、14天时两组较前期integrinβ1表达增多但差异不明显;α-SMA染色肉芽组织中肌成纤维细胞的标记物结果提示3天、5天、7天实验组中的表达明显少于对照组,但14天时差异则不明显;ki67染色检测创面中细胞的增殖情况,结果提示3天时实验组较对照组创面染色阳性细胞少,增殖活性较对照组差;Western blot检测创面中integrinβ1的表达量,结果提示3天和5天时创面中的integrinβ1含量实验组明显少于对照组,7天和14天两组中较前表达均升高,但差异不明显。结论integrinβ1拮抗剂小鼠皮下缓释给药造模有效;integrinβ1拮抗剂会抑制创面修复过程中角质细胞迁移,减慢创面上皮化进程,阻碍创面早期收缩过程,降低创面周围细胞增殖代谢,减慢创面的愈合。