人工授精结合胚胎移植诱发肉牛双胎技术的研究

作     者：依斯拉穆·麦麦提吐尔逊 

作者单位：塔里木大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王选东;高庆华

授予年度：2016年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：人工授精 胚胎移植 牛 诱发双胎 IVF 

摘      要：本文是采用肉牛的AI(人工授精)+MOET(超数排卵和胚胎移植)技术与其相关的诱导同期发情、体外受精技术等相关繁殖技术的系统运用,进一步扩大使低生产性能的肉牛诱发产优良品种的双胎犊牛的研究和应用;从提高牛的繁殖效率和加快品种改良两个方面同时进行,来达到高效率和高品质发展养牛产业的目的.实验一两种方法诱导高寒牧区牛同期发情的效果为比较在高寒牧区推广使用的两种同期发情方法,本试验选择90头年龄4-7岁的经产母牛,随机分为A (n=30)、B (n=30)、C (n=30)三组,提前lOd单独组群补饲;A组母牛进行PG方法处理,B组母牛进行CIDR+PMSG方法处理,C组自然发情作为对照,观察统计第一情期的同期发情情况并人工授精妊娠率,以及同期发情开始和持续时间。结果表明：A组、B组和C组母牛第1情期(2-4d)的同期发情率分别为73.3%、86.6%、20.0%,同期发情率A组与B组互相对比差异不显著(P0.05),A组、B组显著高于C组(P0.05);A组、B组发情开始时间分别为63.2±8.5h和45.3±9.5h,组间差异显著(P0.05)。说明在高寒牧区采用PG和CIDR+PMSG方法对牛进行同期发情处理达到了预期的效果即同期发情率分别为73.3%和86.6%,受胎率分别为63.6%和73.1%,可以在高寒牧区任选一种方法应用。实验二AI+MOET诱发肉牛双胎研究实验旨通过人工授精后肉牛作为受体牛进行胚胎移植,建立一套完整的AI+ET技术体系,提高肉牛双胎率。采用CIDR+FSH+PG方法对12头高寒牧区和农区供体牛进行超数排卵,同时90头受体牛随机分为3组。A组采用2次PG方法,B组采用CIDR+PMSG+PG方法进行同期发情。将供体牛在发情配种后7d从子宫角收集的胚胎移植到同期发情并进行人工授精后7d的受体牛子宫内,第45-55d用B超进行妊娠和胎数鉴定。结果显示：高寒牧区和农区超数排卵回收的平均可用胚胎数分别为5.65枚和6.15枚,可用胚率分别为66.8%和67.4%,农区的的平均可用胚胎数高于高寒牧区,但两者差异都不显著(P0.05)。第一情期2-4d的同期发情率分别为高寒牧区A组80%,B组90.0%,农区A组84.0%,B组95%;同地区A组和B组同期发情率相比差异显著(P0.05)。实验三安格斯牛超数排卵、同期发情及胚胎移植试验效果与分析通过对安格斯牛超数排卵、同期发情以及双胚胎移植的试验研究,分析影响安格斯超数排卵,受体牛同期发情以及胚胎移植双胎率的效果因素。本试验采用CIDR+FSH+PG方法对10头供体牛进行超数排卵,受体牛总共120头随机分为3组,A组采用1次PG方法,B组采用CIDR+PMSG+PG方法进行同期发情,C组为自然发情,不做任何处理。同时将鲜双胚胎移植30头受体牛,第45-55d用B超进行妊娠鉴定和胎数。结果显示：安格斯牛超数排卵回收的平均可用胚胎数分别6.4枚,可用胚率分别为72.0%;第一情期2-4d的同期发情率A、B、C组分别为81.6%、96.6%、23.3%,B组高于其他2组,互相对比差异显著(P0.05);牛双胚胎移植妊娠率和双胚率分别为53.3%(16/30),双胎率53.3%(8/15)。实验四IVF技术研究采用从屠宰场采集的母牛卵巢作为试验材料,研究了卵泡冲洗法、剖切法、卵泡冲洗法+剖切法等不同卵母细胞采集方法,卵母细胞成熟液(TCM)中分别添加当天发情牛血清和胎牛血清等不同来源的血清,以及SOF和TCM胚胎培养体系对受精卵裂率和发育的影响。结果表明：卵泡冲洗法获得A、B级卵母细胞比例为(73.7%)高于剖切法(67.7%)、卵泡冲洗+剖切法(68.6%)(P0.05);卵泡冲洗法+剖切法获得平均卵母细胞数(5.2个/枚)显著高于其他2种方法即卵泡冲洗法(4.2个/枚)和剖切法(3.8个/枚),差异显著(P0.05);含ECS的成熟液中卵母细胞成熟率显著高于FCS添加的成熟液(P 0.05)。SOF和TCM胚胎胎培养体系在卵裂