有机磷酸酯类阻燃剂诱导氧化损伤和内分泌干扰效应研究

作     者：陈冠良 

作者单位：浙江工业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：傅正伟;靳远祥

授予年度：2015年

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主      题：有机磷酸酯类阻燃剂 氧化损伤 内分泌干扰 睾丸间质细胞TM3 小鼠 

摘      要：磷酸三苯酯(TPP)、磷酸三(2-氯乙基)酯(TCEP)和磷酸三(丁氧基乙基)酯(TBEP)是广泛存在于日常生活环境中的几种典型的有机磷酸酯类阻燃剂(OPFRs)。作为一类新型环境污染物,因其在全球范围内的广泛分布,成为了环境污染研究方面新的热点。之前的研究报道认为,OPFRs对生物体有潜在的毒性作用,但机理仍未明确。本实验选择具有代表性的OPFRs,TPP,TBEP和TCEP为材料,以睾丸间质细胞(TM3)及其小鼠为实验对象,研究不同浓度三种阻燃剂对生物体外与体内的毒性影响及其可能的作用机理。在体外细胞实验方面,首先研究3种OPFRs对TM3细胞活力和形态的影响。在此基础上,评估了三种阻燃剂对细胞氧化氧化损伤的作用,分析了其对相关调控基因转录水平和对应酶活力变化的影响。同时,通过比较TM3细胞在有/无人体绒膜促性腺激素(h CG)刺激后,研究了三种阻燃剂暴露对细胞中睾酮(T)合成主要相关基因转录水平和T含量的影响。最后,在体内动物实验方面,选用TPP和TCEP两种OPFRs,以青春期ICR雄鼠作为实验对象,口服暴露处理5周后,分析了OPFRs对引起小鼠体内氧化损伤和内分泌干扰的毒性效应。研究结果表明,三种阻燃剂暴露会造成TM3细胞活力降低,形态发生改变,并呈现典型的剂量效应关系。高浓度OPFRs会造成细胞内一些抗氧化酶如SOD,CAT和GST及它们相对应基因表达的显著变化。其次,OPFRs能够干扰细胞睾酮合成主要相关基因的表达同时减少T产量并抑制因为hCG刺激而引起的基因和T上调效果。最后,高浓度OPFRs暴露还会导致小鼠肝脏和睾丸重量的显著下降。同时,导致肝脏中抗氧化酶和其相关基因表达的显著变化,并会显著降低睾丸中睾酮合成相关基因的表达以及睾酮含量。综上所述,通过体内、体外实验证明OPFRs暴露可以诱导生物体产生氧化损伤和内分泌干扰效应,研究结果对评价有机磷酸酯的毒理机理提供有力的证据。