右旋磷霉素的生物转化

作     者：胡芳欣 

作者单位：沈阳药科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：胡江春

授予年度：2009年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 10[医学] 

主      题：右旋磷霉素 微生物生物转化 筛选 杀虫活性 

摘      要：右旋磷霉素FOM(+)为磷霉素生产中产生的无生物活性物质。磷霉素生产目前主要采用化学合成法,生产收率不到20%,主要原因是在环氧化过程中形成的是消旋体,50%无疗效的左旋对映体即右旋磷霉素,作为废弃物被排放掉,导致生产成本难以下降以及资源浪费和环境污染等问题。从结构上看,右旋磷霉素具有高稳定的碳磷共价键,使转化具有一定难度。 生物转化法因具有高度选择性,可顺利完成一般化学方法难以实现的反应,反应条件温和,工艺简单,成本较低,产物浓度高,转化率及生产效率高,副产物少等优势。 为了更好的利用大量无活性的右旋磷霉素,提高资源的利用率,变废为宝,本论文以东北制药总厂FOM分厂厂区内的土壤样品为筛选基础,通过以右旋磷霉素为唯一碳源模型对40份土壤样品和85株供试菌株进行筛选,得到微生物转化右旋磷霉素的待选菌种47株,进一步对右旋磷霉素进行微生物生物转化,结合转化产物的生物活性筛选模型,建立了有潜在应用价值的微生物转化体系,得到3株抗大肠杆菌的FOM(+)转化菌株,分别是FM77、FM94、DYF2-1;杀卤虫活性筛选得到7株活性菌株,其中FM94发酵转化液活性最高并且较为稳定。首次发现和报道了三株FOM(+)转化真菌FM94、FM130、LF061,经形态学和ITS序列系统发育树方法,分别鉴定为Gibberella fujikuroi, Fusarium solani, Fusarium proliferatum。其中以菌株FM94为代表,研究了其生物转化右旋磷霉素的发酵条件和转化产物的基本特性。结果表明该菌株在以右旋磷霉素为唯一碳源,初始pH为3.5,转化培养第4天时转化产物杀卤虫活性最高。并用乙酸乙酯萃取转化产物,得到的杀虫转化产物产量达到5.28g·L-1,经HPLC检测,为较单一组分,其研究结果为进一步研究开发提供了科学依据。