山丹鳞茎总皂甙提取纯化及其抗氧化、抑菌活性研究

作     者：邵青 

作者单位：延安大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王延峰

授予年度：2016年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：山丹 总皂甙 提取分离 抗氧化 抑菌 

摘      要：山丹为百合科百合属多年生草本植物,不仅具有良好的观赏价值,且有显著的药用功能。皂甙类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、抑菌、降胆固醇、调节免疫活性等药理作用。实验以山丹鳞茎为原料,对其总皂甙的提取、分离纯化及其抗氧化活性、抑菌活性进行了初步研究,为陕北地区山丹资源的保护、开发及利用提供一定参考依据。主要研究结果如下:1.山丹鳞茎总皂甙超声提取工艺条件的优化为优化山丹鳞茎总皂甙超声提取工艺,实验通过研究乙醇浓度、料液比、超声时间和提取温度四个因素对山丹鳞茎总皂甙提取率的影响,采用Box-Behnken Design响应面法优化山丹鳞茎总皂甙超声提取工艺,所得提取工艺条件为乙醇浓度72%,液料比16:1 mL/g,超声时间12min及提取温度62℃。经证明,山丹鳞茎总皂甙提取含量实验值6.293mg/g与理论值6.320mg/g基本一致。2.大孔吸附树脂分离纯化山丹鳞茎总皂甙工艺的研究通过3种不同型号树脂对山丹鳞茎总皂甙静态吸附和解吸的性能实验,筛选出纯化效果相对较好的树脂,即D101型大孔吸附树脂。利用D101大孔吸附树脂,对富集、纯化山丹鳞茎总皂甙工艺参数的影响因素进行了初步研究。结果表明:在上样原液浓度为6mg/mL,pH为8的条件下进行吸附,解吸条件为乙醇浓度70%,0.5BV/h的洗脱流速。在此条件下对山丹鳞茎中总皂甙进行纯化,提取物总皂甙的含量提高了4.35倍。3.山丹鳞茎总皂甙体外抗氧化活性研究山丹鳞茎总皂甙体外抗氧化活性实验结果表明:还原能力在浓度为2.0mg/mL时吸光度达到0.945,吸光度随着山丹鳞茎总皂甙浓度的增大而升高,其还原能力与吸光度具有一定正相关性。当浓度达到5.0mg/mL时,羟基自由基（·OH）清除率为59.68%;当浓度达到1.0mg/mL时,超氧根阴离子（O2-·）清除率为40.58%;当浓度达到1.5 mg/mL时,DPPH（1,1-二苯基苦基苯肼）清除率为76.06%,以上数据显示山丹鳞茎总皂甙具有一定体外抗氧化活性。4.山丹鳞茎总皂甙抑菌活性研究采用滤纸片法,研究山丹鳞茎总皂甙样品对白色念球菌、白色葡萄球菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、伤寒杆菌、黄瓜枯萎病菌、棉花枯萎病菌、苹果腐烂病菌的抑菌性能。结果表明,山丹鳞茎总皂甙对这10种菌都有一定的抑制作用,且对细菌的抑制性能明显高于真菌,特别是对白色葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的表现出较强的抑制性。