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MicroRNA-429对膀胱癌细胞增殖侵袭的影响

MicroRNA-429对膀胱癌细胞增殖侵袭的影响

作     者:蒋庆详 

作者单位:南华大学 

学位级别:硕士

导师姓名:黄江波

授予年度:2013年

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题:miRNA miR-429 膀胱癌 

摘      要:目的:通过研究miR-429对人膀胱癌BIU-87细胞增殖侵袭的影响,探讨miR-429在人膀胱癌细胞中的作用机制。 方法:通过基因芯片筛选出人膀胱癌组织较癌旁正常组织的差异表达的miRNA,实时定量PCR验证相关miRNA的差异表达;并构建miR-429反义核苷酸序列(AS-miR-429)下调miR-429的表达,瞬时转染人膀胱癌BIU-87细胞。然后,实时定量PCR检测miR-429表达水平的变化。最后,运用MTT实验、流式细胞仪检测细胞的增殖与凋亡;并通过Trans-well实验,检测细胞的侵袭力。 结果:基因芯片筛选发现miR-429、miR-143、miR-106a等在膀胱癌组织中差异表达,其中miR-429在膀胱癌组织中显著上调;实时定量PCR验证发现miR-429在膀胱癌组织中亦显著上调。成功构建miR-429反义核苷酸序列,并成功瞬时转染人膀胱癌BIU-87细胞。实时定量PCR检测转染结果显示,miR-429表达在膀胱癌细胞中降低16倍,差异有统计学意义(P0.05)。转染48小时后,MTT法检测发现AS-miR-429明显抑制BIU-87细胞的增殖,流式细胞仪检测BIU-87细胞的凋亡率明显升高;而Trans-well实验结果则表明,AS-miR-429对BIU-87细胞的侵袭力有明显影响。 结论:***-429在膀胱癌组织中显著上调。 ***-429促进人膀胱癌细胞增殖,并使膀胱癌细胞侵袭力明显增加。

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