灰毛豆种子化学成分及活性成分鱼藤酮与12α-羟基鱼藤酮的残留分析

作     者：王苏宁 

作者单位：湖南农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李有志

授予年度：2012年

学科分类：090403[农学-农药学(可授农学、理学学位）] 09[农学] 0904[农学-植物保护] 

主      题：灰毛豆种子 化学成分 鱼藤酮 12a-羟基鱼藤酮 残留动态 

摘      要：本文综述了植物源农药的研究进展,分离、鉴定了灰毛豆Tephrosia pur purea种子甲醇提取物中氯仿萃取物中的主要化学成分,建立了该植物中主要杀虫成分鱼藤酮和12a-羟基鱼藤酮的残留分析方法并研究了其残留动态。具体内容如下： 1、借助多种色谱技术(硅胶柱层析、反相柱层析、凝胶柱层析、薄层层析、高效液相色谱)和重结晶等方法从该种子氯仿萃取物中分离纯化得到8个化合物,通过解析这些化合物的核磁共振图谱(1H NMR和13C NMR)和质谱图,确定它们是6a,12a-dehydro-deguelin、 Tephrosin、Obovatachalcone、Obovati、Isolonchocarpin、Pongachin、Penduletin和Raffinose。测定了6个化合物(Isolonchocarpin、Obovatin、Tephrosin、Pongachin、12a-hydroxyrotenone和Rotenone)对黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus)工蚁成虫和二化螟(Chilo suppressalis)的生物测定,结果显示除Pongachin外,其余化合物对黑翅土白蚁工蚁成虫均有触杀活性;Isolonchocarpin和Tephrosin对白蚁有较弱的忌避活性,其余化合物作用不明显;毒力传递结果表明,12a-hydroxyrotenone经该虫交叉传递,在56h内可导致供试白蚁100%死亡,而Obovatin和Rotenone56h内导致的死亡率分别是24.3%和38.7%;Tephrosin、12a-hydroxyrotenone和Rotenone对二化螟有毒杀活性,其LCso值分别是181.4、203.8和503.2mg/10g。 2、建立了固相萃取-高效液相色谱-紫外(SPE-HPLC-UV)检测青菜Brassica chinensisL.中鱼藤酮残留的方法,并研究了青菜中鱼藤酮的残留动态。样品首先经乙腈提取后,在乙腈提取液中加入NaCl,盐析后经Florisil固相萃取柱富集净化,再用正己烷-乙醚(3：7,v/v)洗脱,最后以乙腈-水(60：40,v/v)为流动相在290nm波长下用高效液相色谱可检测分析青菜中鱼藤酮的含量。检测物在0.05～10mg/kg范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9999。在0.5～5.0mg/kg浓度范围内,平均加标回收率在85.9%～86.3%,检出限为0.05mg/kg。在2.5%鱼藤酮EC田间用量为100mL/667m2和300mL/667m2时,鱼藤酮在青菜中的原始沉积量分别为6.26mg/kg和18.34mg/kg,消解方程分别为Ct=5.6541e-0.0533t和Ct=21.892e-00783t,半衰期分别为11.2h和11.1h。 3、建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测烟草中鱼藤酮残留的分析方法,并对烟草中鱼藤酮的含量进行动态分析。样品经乙腈提取NaCl盐析后用Florisil固相萃取柱富集净化,采用ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.1%甲酸溶液和乙腈(50：50,v/v)为流动相,在ESI+模式下测定。该方法稳定可靠,检测物在0.005～0.2mg/kg范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9999。平均加标回收率为96.8%～97.3%。当2.5%鱼藤酮EC田间用量为100ml/667m2和300ml/667m2时,避光处理下鱼藤酮在烟草中的原始沉积量分别为10.56mg/kg和20.01mg/kg,半衰期为20.4h和24.6h;不避光处理下为9.61mg/kg和19.76mg/kg,半衰期为10.34h和12.28h。 4、研究了利用液相色谱-串联质谱同时检测烟草中鱼藤酮和12a-羟基鱼藤酮的方法,样品经乙腈提取NaCl盐析后用Florisil固相萃取柱富集净化,采用ZORBAX SB-C18色谱柱,0.1%甲酸-乙腈(1：1,v/v)为流动相,在ESI+模式下测定。方法稳定可靠,检测物在0.002～0.05mg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,2种物质的平均回收率为95.8%～97.9%。