肾上腺髓质素参与骨癌痛和神经病理性痛的发生及其机制

作     者：霍媛慧 

作者单位：福建师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：洪炎国

授予年度：2015年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：神经病理性痛 肾上腺髓质素(AM) 骨癌痛 脊神经结扎 降钙素基因相关肽(CGRP) 向细胞介素-1β(IL-1β) 

摘      要：肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM)属于降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)家族,广泛存在于脊髓背角浅层与背根神经节(DRG)的肽能和非肽能神经元。研究指出,AM是一种痛介导质,但其参与慢性神经痛的机制尚未清晰。为探索AM在神经病理性痛发生和维持过程的作用机制,以及与CGRP、白细胞介素-1β(interleukin 1β, IL-1β)、NO之问的关系,本研究建立在骨癌痛、L5脊神经结扎SNL基础上,采用影像学、行为学、免疫组织化学和实时荧光定量PCR (quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)等实验技术探讨：(1)骨癌引起大鼠组织学、行为学的变化;(2)骨癌痛诱发大鼠脊髓背角和DRG中AM、CGRP和nNOS的表达情况;(3)AM特异性受体拮抗剂AM22-52对骨癌诱发大鼠痛觉过敏和AM、CGRP、NOS表达的影响;(4)SNL大鼠机械痛阈值的变化以及AM、CGRP、IL-1β的表达情况;(5)鞘内注射AM22-52对SNL大鼠行为学的影响;(6)鞘内注射AM22-52 对 SNL诱发大鼠脊髓和DRG中AM、CGRP、IL-1β表达的影响。实验结果如下：(1)骨癌大鼠第7天出现体重下降、明显的骨破坏现象,并产生机械痛觉过敏和热痛觉过敏。(2)骨癌痛引起AM及其受体、CGRP和nNOS在脊髓背角和DRG中表达增加,染色显示AM主要分布于DRG中、小型神经元。(3)鞘内注射AM22-52,翻转了骨癌痛诱发的痛觉过敏及脊髓背角和DRG内AM、CGRP、NOS的表达增加。(4)大鼠脊神经结扎处理后第10天机械阈值下降50%左右,产生痛觉过敏。DRG和脊髓背角中AM、CGRP、IL-1β的表达明显增加。(5)鞘内注射AM22-52可缓解SNL引发的痛觉过敏。(6)鞘内注射AM22-52可明显缓解脊髓和L4中CGRP表达增加,而AM和IL-1p表达量反而升高。以上研究结果表明,骨痛和神经损伤能诱导AM合成增加,阻断AM受体可明显缓解疼痛;神经病理性痛诱导的细胞信号级联反应中,AM可能是使促痫介质CGRP和促炎性细胞因子IL-1β、nNOS等表达增加的上游因子。与此同时,除AM、CGRP通路以外,可能存在免疫机制或其他潜在的信号通路诱导促炎因子IL-1β的表达,参与疼痛的发生。