柴胡皂苷a对颅脑创伤后大鼠认知功能的保护作用及其机制的研究

作     者：茆翔 

作者单位：安徽医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘佰运

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：颅脑创伤 炎性反应 认知功能 颅脑创伤 炎性反应 柴胡皂苷a 认知功能 

摘      要：目的 颅脑创伤在各部位的创伤造成的死残中居第1位。在我国，颅脑创伤每年大概发生超过100万人次，其中死亡和严重残疾患者超过10万人，其中长期昏迷和植物生存就超过1万人，造成的直接及间接经济损失达数百亿元。颅脑创伤后的认知障碍被认为是最严重、持续时间最长的症状之一，经常体现为注意力及记忆力的改变，然而对于颅脑创伤后认知障碍的确切机制仍不清楚。颅脑创伤后的炎性反应在继发性脑损伤中起重要的作用。本实验的目的在于观察颅脑创伤后大鼠认知功能的改变，并初步探讨炎性反应在对认知功能产生影响中的可能机制。 方法 采用皮层可控性打击(controlled cortical impact, CCI)装置建立大鼠中度颅脑损伤模型，随机将实验动物分为假手术组和损伤组，利用18分的Chen评分法评价打击后的大鼠神经功能缺损程度(neurological deficit score, NSS);利用磁共振成像(MRI)监测打击侧脑组织的损伤体积;Morris水迷宫用于测定实验大鼠的认知功能;利用酶联免疫吸附剂测定法测定肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α, TNF-α)和白介素-6(interleukin-6, IL-6);采用同样的方法对脑源性神经生长因子(brain derived neurophic factor, BDNF)进行测定，并采用方差分析方法进行统计学分析，p0.05表示有统计学差异。 结果 成功建立大鼠的中度皮层可控性打击损伤模型，NSS显示颅脑创伤后大鼠的神经功能和假手术组相比较缺损明显，MRI的T2加权像显示打击侧的脑组织损伤明显，Morris水迷宫显示颅脑创伤后大鼠的认知功能和假手术组相比较下降明显，具有明显的统计学意义(p0.05);同时颅脑创伤后的实验大鼠打击侧的海马组织中TNF-α及IL-6的水平较假手术组明显升高，具有统计学差异(p0.05);而损伤组大鼠打击侧的海马组织中BDNF的水平较假手术组明显下降，并且具有统计学意义(p0.05)。 结论 本实验初步证实炎性反应参与颅脑创伤后大鼠认知功能改变的发生过程，同时与认知功能密切相关的BDNF可能参与其中。 目的 颅脑创伤在各部位的创伤造成的死残中居第1位。在我国，颅脑创伤每年大概发生超过100万人次，其中死亡和严重残疾患者超过10万人，其中长期昏迷和植物生存就超过1万人，造成的直接及间接经济损失达数百亿元。颅脑创伤后的认知障碍被认为是最严重、持续时间最长的症状之一，经常体现为注意力及记忆力的改变，然而对于颅脑创伤后认知障碍的确切机制仍不清楚。颅脑创伤后的炎性反应在继发性脑损伤中起重要的作用。颅脑创伤后的炎性反应参与了与认知相关的神经递质的调节。炎性反应被认为是颅脑创伤后认知障碍中的重要机制。近年来人们发现柴胡皂苷a(Saikosaponin a,SSa)具有极强的抗炎作用。本实验的目的在于观察柴胡皂苷a对颅脑创伤后大鼠认知功能的保护作用。 方法 采用皮层可控性打击(controlled cortical impact，CCI)装置建立大鼠中度颅脑损伤模型，随机将实验动物分为假手术组，损伤+生理盐水组和损伤+柴胡皂苷a组，利用18分的Chen评分法评价打击后的大鼠神经功能缺损程度(neurologicaldeficit score，NSS);利用磁共振成像(MRI)监测打击侧脑组织的损伤体积;Morris水迷宫用于测定实验大鼠的认知功能;利用酶联免疫吸附剂测定法测定肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白介素-6(interleukin-6，IL-6);采用同样的方法对脑源性神经生长因子(brain derived neurophic factor，BDNF)和环磷酸腺苷(cyclic AMP，cAMP)进行测定，;采用Western Blot方法分别测定打击侧海马组织中与认知相关蛋白的水平，包括磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(phosphorylation-cAMP-response element binding protein,pCREB)，环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)，并采用方差分析方法进行统计学分析，p0.05表示有统计学差异。 结果 成功建立大鼠的中度皮层可控性打击损伤模型，NSS显示颅脑创伤后大鼠的神经功能和假手术组相比较缺损明显，MRI的T2加权像显示打击侧的脑组织损伤明显，Morris水迷宫显示颅脑创伤后大鼠的认知功能和假手术组相比较下降明显，具有明显的统计学意义（p0.05）;同时颅脑创伤后大鼠打击侧的海马组