东海刺海参冻干粉抑瘤作用的研究

作     者：周湘盈 

作者单位：山东大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐贵发

授予年度：2008年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：海参 荷瘤小鼠 乳腺癌 潜伏期 诱发率 

摘      要：目的 研究东海刺海参冻干粉对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫功能的影响。同时研究了海参冻干粉对大鼠乳腺癌的抑制作用并探讨了其机理。 方法 1健康昆明小鼠50只,皮下接种S180肿瘤细胞,次日随机分成模型对照组,阳性对照组(20mg/kg.d),低、中、高三个剂量组(0.4g/***,0.8g/***,1.6g/***),连续给予受试物10天后,观察瘤重、抑瘤率;瘤组织的病理改变,免疫组化法测定瘤组织中caspase-3蛋白以及bax和bcl-2的蛋白表达;脾指数、胸腺指数;利用ELISA法检测血清中IL-2和TNF-α的含量。 2健康SD大鼠80只,随机分成2大组,对照组20只,海参组60只。对照组又分为空白对照组10只与模型对照组10只(DMBA),海参组分为DMBA致癌前喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组(0.5g/***、1.0g/***、2.0g/***)和DMBA致癌后喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组(0.5g/***、1.0g/***、2.0g/***)。模型组与DMBA致癌前喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组:先用海参冻干粉溶液灌胃2周,再给予致癌剂DMBA(即从第3周开始),再持续灌胃到24周结束;DMBA致癌后喂饲海参冻干粉低、中、高剂量组:先给予致癌剂DMBA(即从第3周开始),2周之后再灌胃海参冻干粉溶液,持续灌胃到24周结束。观察各组大鼠肿瘤的平均潜伏期、肿瘤诱发率,乳腺标本经光镜观察,免疫组化法测定VEGF、bFGF、PCNA的蛋白表达。 结果 1海参冻干粉对小鼠S180肉瘤的抑制作用:①海参中、高剂量组与模型对照组比较瘤重明显减小,体积明显减小,抑瘤率显著增加,具有统计学意义(P0.05或P0.01)。②模型对照组的病理改变较之中高剂量组非常明显,各剂量组caspase-3蛋白表达明显高于模型对照组(P0.01),低于阳性对照组。中、高剂量组的bcl-2的蛋白表达远远低于模型对照组的表达(P0.05),海参低、中剂量组与阳性对照组相比其bcl-2的蛋白表达则明显升高(P0.05)。海参冻干粉高剂量组的bax蛋白表达远远高于模型对照组的蛋白表达(P0.01),与阳性对照组相比,海参各剂量组的bax蛋白表达显著降低(P0.05)。③脾指数、胸腺指数有一定的增加趋势,海参各剂量组与模型对照组和阳性对照组相比无统计学意义。④与模型对照组相比海参中、高剂量组的IL-2含量显著增加(P0.01),海参各剂量组IL-2的含量显著高于阳性对照组(P0.01)。海参冻干粉高剂量组TNF-α的含量与模型对照组相比显著增加,具有统计学意义(P0.05),阳性对照组的TNF-α的含量显著高于海参冻干粉各剂量组(P0.01)。 2海参冻干粉对大鼠乳腺癌的抑制作用:①各个海参冻干粉组与模型对照组相比,其乳腺癌的潜伏期明显延长(P0.01)。②模型组的乳腺癌诱发率达到了70%,其余海参冻干粉各个组的乳腺癌诱发率分别都达到了60%、60%、40%、60%、60%、50%。③抗VEGF:海参冻干粉剂量组与空白对照组相比,各个剂量组的VEGF的蛋白表达均明显升高(P0.01),与模型对照组比较,海参冻干粉各个剂量组除了DMBA致癌前后喂饲海参冻干粉低剂量组外其VEGF的蛋白表达则明显降低,有统计学意义(P0.01)④抗bFGF:海参冻干粉各个剂量组与空白对照组相比较其bFGF的蛋白表达明显升高(P0.01),与模型对照组相比海参冻干粉剂量组除了DMBA致癌前喂饲海参冻干粉低剂量组、DMBA致癌后喂饲海参冻干粉低、中剂量组外,其余各个组的bFGF的蛋白表达明显降低(P0.05)。⑤抗PCNA:海参冻干粉各个剂量组PCNA的蛋白表达显著高于空白对照组(P0.01),与模型对照组比较海参冻干粉各剂量组除DMBA致癌前后喂饲海参冻干粉低剂量组以外,其余各个剂量组均显著降低(P0.01)。 结论 刺海参冻干粉对荷瘤小鼠有明显的抗肿瘤作用,对其免疫系统具有一定的保护和恢复作用。刺海参冻干粉对诱导性大鼠乳腺癌有明显的抑制作用。