蒺藜果总皂苷肠内菌代谢产物研究

作     者：龚玉萍 

作者单位：长春中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐雅娟

授予年度：2011年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：蒺藜果总皂苷 肠道菌代谢 代谢产物 结构鉴定 

摘      要：目的:研究蒺藜果总皂苷体外人肠内菌代谢和大鼠体内代谢,分析蒺藜果原形皂苷及代谢后产物的变化情况,分离鉴定蒺藜果总皂苷的体外肠内菌代谢产物。探索蒺藜果甾体皂苷结构与代谢产物的相关性,为阐明蒺藜果总皂苷在体内代谢过程和真正起药效作用的成分研究奠定基础。 方法:分别采用离体培养和血液分析的方法研究健康人肠道菌群和大鼠肠道对蒺藜果总皂苷的代谢情况,通过TLC和HPLC-ELSD、HPLC-APCI-MS分析手段,检测了蒺藜果总皂苷经离体人肠内菌代谢和大鼠体内代谢产物。通过富集培养、硅胶柱分离、TLC、HPLC-ELSD等色谱技术,从蒺藜果总皂苷肠内菌代谢产物中分离纯化代谢产物,并进一步通过化学方法和现代波谱技术(1 NMR,(13) NMR,APCI-MS,HPLC-MS等)鉴定代谢产物的结构。 结果:在蒺藜果总皂苷人肠内菌代谢产物检测到海柯皂苷元、曼诺皂苷元、海柯酮皂苷元、25R-螺甾-3,5二烯-12酮苷元、鲁斯可皂苷元、吉托皂苷元、薯蓣皂苷元、25R-螺甾-3,5二烯苷元、绿莲皂苷元9种皂苷元。 在蒺藜果总皂苷大鼠体内血清中检测到25R-螺甾-3,5二烯-12酮苷元、海柯酮、海柯皂苷元、25R-螺甾-4烯-2,3-二羟-12酮苷元4个皂苷元。 从蒺藜果总皂苷人肠内菌体外代谢产物中分离得到5个单体化合物,鉴定为:十九烷酸(Ⅰ)、替告皂苷元(Ⅱ)、海柯皂苷元(Ⅲ)、吉托皂苷元(Ⅳ)、曼诺皂苷元(Ⅴ)。 结论:通过对蒺藜果总皂苷肠内菌体外代谢产物及大鼠血中代谢产物的分析鉴定,表明蒺藜果总皂苷经过人肠内菌体外培养及大鼠体内代谢,主要代谢成极性较小的苷元等成分。此外,我们发现HPLC-ELSD图谱中显示血清中含有极性小的苷元成分,随着代谢时间的增加,在代谢1小时时出现一个色谱峰,6小时该色谱峰减弱,该色谱峰从无到有,从少到多,再由多到少的动态变化过程。该成分有待进一步分析鉴定。