急性高眼压后大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶的表达变化

作     者：童建斌 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：罗学港

授予年度：2003年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

主      题：谷氨酰胺合成酶,Muller细胞,缺血 

摘      要：青光眼是由眼内压升高和缺血等多因素引起的，以视神经损伤和节细胞死亡为特征的主要致盲眼病。大量研究表明其节细胞的丢失可能与谷氨酸毒性有关。然而谷氨酸的主要代谢酶——谷氨酰胺合成酶在青光眼视网膜中的表达变化及其作用尚不清楚。本实验用急性高眼压模型检测了急性高眼压后大鼠视网膜中谷氨酰胺合成酶的表达。成年健康Wistar大鼠48只：假手术组(3只)，手术组(45只)，左眼眼压升高至ERG b波消失的临界眼内压并维持90分钟，右眼对照。分别存活0天，1天，3天，7天，14天后处死，用免疫组织化学染色和Western blot检测视网膜中谷氨酰胺合成酶的表达。结果显示：正常视网膜中，谷氨酰胺合成酶免疫组织化学染色主要见于Muller细胞胞体;0天组中，Müller细胞胞体染色变淡，内网层中表达增加，且呈明显的点状或带状分布;1天组、3天组中Müller细胞胞体染色逐渐变淡，而内网层中呈现弥散染色。至再灌第7天、14天，Müller细胞胞体又出现浓的染色。在此过程中，节细胞层中空泡周围的染色无明显变化。平均灰度值显示：与正常组相比，0天组中谷氨酰胺合成酶表达有增加但差异无显著性;1天组中表达显著增加，3天组、7天组表达逐渐减少，至第14天时基本恢复正常。Western blot显示谷氨酰胺合成酶为一分子量约为45kDa的单一蛋白带，与其它组比1天组中表达显著增加。所有这些表明：急性高眼压后，谷氨酰胺合成酶的表达上调和重新分布可能加速了胞外谷氨酸的代谢，从而对缺血再灌条件下的视网膜特别是节细胞有保护作用。