促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后影响研究

作     者：葛洪亮 

作者单位：广西医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：贺茂林

授予年度：2012年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：促红细胞生成素 脊髓损伤 P53 免疫组化 运动功能 不同时间 

摘      要：第一部分促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后研究 目的 探讨促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后凋亡蛋白P53表达的研究。 方法 将44只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组A（n=4）、对照组B（n=20）、实验组C（n=20）,A组咬除椎板不损伤脊髓,B、C组按改良Allen打击法建立大鼠脊髓损伤模型;C组术后3h腹腔注射EPO（1000IU/kg）,A、B两组术后3h腹腔注射等计量生理盐水。通过Tarlov评分评价（6h、1d、3d、7d）点每组大鼠神经功能恢复情况;后取大鼠脊髓损伤组织做免疫组化染色检测P53阳性细胞的表达,来比较分析两组的差别。 结果 对照组各时间点的Tariov评分与假手术组、实验组差别有显著性意义（P0.05）。对照组、实验组6h出现P53表达,后不同程度的凋亡增加,3d达到高峰,7d减少。实验组P53表达各时间点明显少于对照组（p0.05）,Tarlov评分与P53细胞凋亡有关,相关系数r=-0.5290,差别有显著性意义（P=0.0160.05）。 结论 脊髓损伤后能诱导P53表达;Tarlov神经功能评分降低与P53表达升高有关;促红细胞生成素能降低P53表达,对脊髓损伤有保护作用。 第二部分不同时间应用促红细胞生成素对大鼠脊髓损伤后研究 目的 观察不同时间应用重组促红细胞生成素（rHu-EPO）对大鼠脊髓损伤（SCI）后运动功能的改善及病理学的变化,为临床应用促红细胞生成素保护脊髓功能提供更多的理论指导。 方法 64只雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组A（n=4）、对照组B（n=20）、EPO防治组C（n=20）、EPO治疗组D（n=20）,A组咬除椎板不损伤脊髓,B、C、D组采用改良Allen法建立脊髓损伤模型,C组术前3h腹腔注射EPO（1000IU/kg）,D组术后3h腹腔注射EPO（1000IU/kg）,A、B两组注射等计量生理盐水。各组术后6h、1d、3d、7d四个时间点通过BBB评分和斜板实验对大鼠后肢神经功能恢复情况进行评价,后取大鼠脊髓损伤处行HE染色,观察各组病理学变化。 结果 运动学评分：EPO防治组C、治疗组D各时间点明显优于对照损伤组B（P0.05）;6h时间点C、D组中,运动学评分没有显著性差异（P0.05）;在1d、3d、7d时间点C、D组中,运动学评分有明显差异,有统计学意义（P0.05）。病理学：A组脊髓灰白质结构清晰,神经元丰富;B组脊髓损伤出出血、坏死,结构紊乱,并逐渐加重;D组较B组损伤轻,后结构逐渐清晰。C组较B、D组损伤轻,出血少,细胞肿胀轻微,后肿胀基本消退。 结论 EPO能促进神经运动功能的恢复,对大鼠脊髓损伤后具有保护作用;EPO防治组与治疗组6h疗效一致。在1d、3d、7d时间点,EPO预防治疗组效果更好,术前3h开始应用EPO较术后效果更好。