长期低剂量α粒子诱发人支气管上皮细胞转化潜能的研究

作     者：刘伟利 

作者单位：复旦大学 

学位级别：硕士

导师姓名：邵春林

授予年度：2014年

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 

主      题：长期低剂量辐射 α粒子 人支气管上皮细胞 恶性转化 MAPK/Akt 

摘      要：目的：随着核能的发展和核技术的广泛应用,人们在生产、生活和科学研究活动中与辐射接触的机会日益增多。低剂量辐射(LDR)(0.1Gy)的致癌风险得到了广泛关注,但是其相关分子机制仍然并不明确。本论文研究了长期低剂量α粒子诱发人支气管上皮细胞发生转化的潜能,探索了其分子机制。方法：以α粒子照射永生化人支气管上皮细胞Beas-2B,每4天照射一次,每次0.025 Gy,连续照射8次,并在照射后继续传代培养1-2个月。以CCK-8法检测细胞增殖、以细胞粘附实验测定细胞粘附能力、以Transwell迁移及侵袭实验检测细胞的恶性程度、以Western blot法检测细胞恶性转化相关蛋白的表达变化,并采用siRNA干扰实验,检测p38基因对细胞粘附和侵袭能力的影响。结果：Beas-2B细胞经过8次α粒子照射后,其增殖能力明显提高,继续培养1-2个月后,受辐射细胞的后代仍然保持较高的增殖能力,同时,细胞的粘附能力和侵袭能力均显著高于对照,表明细胞的转化潜能得到增强。分子检测表明,受到连续8次α粒子照射并继续培养1、2个月后,细胞内磷酸化Akt与磷酸化P38蛋白的表达均显著高于对照组;磷酸化JNK蛋白在照射后呈现高表达,继续培养后,其表达量则显著低于对照组;磷酸化P66蛋白则随着照射次数的增多表达量逐渐下降,照射后继续培养1-2个月,随着培养时间的延长,磷酸化P66蛋白显著降低;siRNA干扰p38后,受连续α粒子照射细胞及其后代的粘附和侵袭能力均降低。结论：长期低剂量α粒子照射可以增强细胞发生转化的潜能,这种变化可能是通过上调MAPK/Akt通路实现的。