KLF9通过诱导PGC-1α调节小鼠原代肝脏细胞抗ROS基因的表达

作     者：焦涛 

作者单位：北京协和医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：常永生

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：KLF9 PGC-1α 反应活性氧 

摘      要：反应活性氧的产生与清除失衡,会导致组织和细胞受到氧化损伤。现在,普遍认为在神经退行性疾病和心血管等疾病的发生发展过程中氧化应激起重要作用,但是其中的分子机制仍不是很清楚。KLF9在大脑和肝脏中的表达相对较高,但是其在反应活性氧方面方面的作用机制仍然不清楚。过氧化物酶体增殖激活受体γ激活因子1α （PGC-1α）能共激活多种转录因子,如ERRα和PARγ,从而调节细胞内ROS的水平。为了研究KLF9调节小鼠原代肝脏细胞抗ROS基因表达的分子机制,本课题利用过表达和敲低KLF9的腺病毒Ad-KLF9、Ad-shKLF9感染野生型小鼠原代肝脏细胞,并在野生型小鼠和KLF9KO小鼠原代肝脏细胞中通过PGC-1α的拯救实验,用real time PCR和western blot检测抗ROS基因（CAT,SOD2,和GPx1）的表达。 H202可以刺激野生型小鼠原代肝脏细胞抗ROS基因的表达,该刺激作用在KLF9KO小鼠肝脏细胞中明显降低。双荧光报告实验证明KLF9可以激活PGC-1α基因的启动子。在野生型小鼠的原代肝脏细胞中过表达KLF9,抗ROS基因的表达水平明显上调,敲低KLF9的内源性表达,抗ROS基因的表达水平明显下调。通过PGC-1α的拯救实验,可知KLF9的调节作用是通过PGC-1α来实现的。综上所述,KLF9作为一个关键的转录因子,在调节ROS代谢中具有重要作用。本研究将为ROS参与的相关疾病的预防和治疗提供新的思路和方法。