氧化应激影响肉仔鸡肉品质的主要MAPK信号转导通路

作     者：王成 

作者单位：中国农业科学院 

学位级别：硕士

导师姓名：齐广海

授予年度：2010年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：肉仔鸡 氧化应激模型 p38MAPK JNK通路 VC TP 

摘      要：为了研究氧化应激影响肉仔鸡肉品质的主要MAPK信号转导通路,论文分为肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞氧化应激模型优化,氧化应激状态下起主要作用的MAPK信号通路的筛选,抗氧化物质对信号通路的作用及维生素C和茶多酚对慢性应激条件下肉仔鸡生产性能的影响及其MAPK通路四个部分,采用细胞模型和动物应激试验相结合的方法,研究了氧化应激时MAPK信号通路的改变对鸡肉品质的影响机理。现分别摘要如下: 试验一肉仔鸡胸肌卫星细胞氧化应激模型的优化 【目的】以地塞米松(DEX)处理肉仔鸡胸肌卫星细胞(SCs),筛选DEX的最佳作用时间和浓度,以优化肉仔鸡卫星细胞的氧化应激模型。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌SCs按DEX处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/ml)分为7组,分别测定培养不同时间(6 h、12 h、24 h和48 h)点SCs的存活率(MTT法),细胞及培养液丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性。【结果】随DEX浓度升高,SCs中MDA和ROS含量极显著升高(P0.05)。单独抑制剂处理组SCs中SOD和GST活性均显著高于DEX处理组(P0.05)。DEX能抑制SOD和GST基因的表达,抑制率高于37%;与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38MAPK和JNK通路后,DEX对SOD和GST基因的表达无明显抑制作用。【结论】研究揭示,在DEX诱导肉仔鸡胸肌SCs产生氧化应激过程中,p38MAPK和JNK通路起着关键作用。 试验三氧化应激条件下抗氧化物质对p38MAPK和JNK通路的调节作用 【目的】探讨肉仔鸡胸肌SCs氧化应激时,抗氧化物质(维生素C(VC)、维生素E(VE)、茶多酚(TP)、大豆黄酮(DZ)和吡咯喹啉醌(PQQ))对p38及JNK信号通路的作用。【方法】将培养的肉仔鸡胸肌SCs分为12个处理(对照、DEX、p38抑制剂、p38抑制剂+ DEX、JNK抑制剂、JNK抑制剂+ DEX、VC + VE + DEX、VC + DEX、VE + DEX、TP+DEX、DZ + DEX和PQQ + DEX),分别测定SCs培养基中MDA、ROS、SOD和GST含量或活性,并检测MEK3和MEK4基因表达及抗氧化酶基因表达。【结果】与DEX处理相比,所有抗氧化物质处理均显著降低了SCs中MDA与ROS的产量(P0.05),其中VC和TP处理组极显著地降低了MDA和ROS的产生量(P0.01);抗氧化物质处理组SOD和GST活性极显著地高于DEX处理组(P0.