阳丰甜柿组织培养及微型嫁接技术研究

作     者：李畅 

作者单位：中南林业科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：文亚峰;王森

授予年度：2016年

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

主      题：阳丰甜柿 组织培养 砧木培育 微型嫁接 生理指标 

摘      要：阳丰甜柿(Diospyros kaki cv. Youhou)是我国引自日本的完全甜柿品种。该品种引种适应性良好、抗性强、丰产性强,果实具有个大、肉质硬脆、风味佳等特点。本研究以阳丰甜柿和君迁子种子为试验材料,通过对阳丰甜柿离体再生培养过程和微型嫁接技术进行研究,探究了阳丰甜柿组织培养的最佳外植体及最佳消毒方法,筛选出外植体初代培养、继代培养及生根培养的最适培养基,以君迁子幼苗为砧木初步建立了阳丰甜柿微型嫁接技术体系,同时测定了砧穗愈合过程中相关生理指标的变化。主要研究结果如下：(1)筛选出阳丰甜柿组织培养最佳外植体及最适消毒方法阳丰甜柿组织培养以1年生阳丰幼苗的芽片作为外植体组培诱导率最高,生长速度快。阳丰芽片最佳取材时间是6月,接种后外植体的污染率和死亡率明显低于其他取材时间。1年生阳丰芽片的最佳消毒方法是：先用75%酒精处理30s,然后用0.1%升汞处理15 min。(2)筛选出阳丰甜柿组织培养最适培养基及培养条件腋芽诱导最适培养基为(1/2 N) MS+1.0 mg.1/1 ZT+0.1 mg.L-1 IAA,培养28 d后诱导率最高,平均诱导芽数为1.5;继代增殖最适培养基为(1/2 N) MS+1.0 mg·L-1 ZT+2.0 mg.L-1 2ip+0.1 mg.L-1 IAA;生根培养的最适培养基为1/2 MS (1/2 N)+0.75 mg.L-1 IBA,先暗培养7d后,继而转入光下培养30 d;经过炼苗后,阳丰甜柿组培苗能成功移栽,成活率达到85%。(3)初步建立阳丰甜柿试管外微型嫁接技术体系100 mg.L-1的GA3处理君迁子种子能在一定程度上提高君迁子幼苗的基茎,其基茎为2.28 mm;锡箔纸处理能明显促进君迁子幼苗生长初期基茎的增大,基茎最粗达到1.91 mm,与对照相比同时期最大增粗0.44 mm;一定浓度的激素处理能有效促进嫁接口的愈合,本试验结果表明,100 mg.L-1的GA3处理能在一定程度上提高阳丰甜柿微型嫁接成活率。(4)测定嫁接体愈合过程中砧穗相关生理指标的变化在阳丰甜柿试管外微型嫁接愈合过程中,嫁接后接穗中SOD、POD的活性变化趋势相似,整体上均呈现一个先上升后下降的趋势,在嫁接后大约21-28 d左右,酶活性达到最高值,之后开始慢慢降低,砧木中SOD和POD的活性变化趋势不大;可溶性蛋白质含量和可溶性糖含量的变化趋势相似,均呈现先下降后上升的趋势,而砧木君迁子中可溶性蛋白质含量和可溶性糖含量的变化趋势有一定的差异性。(5)初步建立阳丰甜柿试管内微型嫁接技术体系用200 mg.L-1的ZT激素处理接穗,能有效提高阳丰甜柿微型嫁接成活率,成活率为82.33%,比空白对照组高29%。