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荷叶抗菌消炎主要活性成分研究

荷叶抗菌消炎主要活性成分研究

作     者:黄雯 

作者单位:中南林业科技大学 

学位级别:硕士

导师姓名:王平;Chifu Brad Huang

授予年度:2010年

学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题:荷叶 提取分离 抗菌消炎 结构鉴定 

摘      要:荷叶是睡莲科植物莲(Nelumbo nuxifera Gaerth)的叶片,主治去暑利湿,升发清阳,止血,是中医中的一味常用药材。现代药理研究证明,荷叶富含具有明显生理活性的黄酮、生物碱类等成分,有良好的减肥降脂、抗菌、抗病毒、抗氧化等多种功效。目前荷叶的药理研究主要侧重于减肥降脂等方面,对抗菌消炎的研究较少,分离和鉴定的抗菌活性的单体物质很少。本实验以获取荷叶抗菌消炎活性单体物质为目的,对荷叶进行了提取分离和纯化,同时对各阶段的样品进行了抗菌消炎检测,并在此基础上,对获得的单体物质进行了结构鉴定,为荷叶抗菌消炎方面的研究和发展提供了参考。 以加入少量乙醇的热水多次浸提荷叶后,检测提取液的抗菌消炎活性发现,提取物具有良好的抗菌消炎效果,对***的抑制率和对IL-8、IL-6的清除率均超过95%。选用安博莱特树脂柱、以蒸馏水、20%乙醇、50%乙醇和95%乙醇进行梯度洗脱,分别检测各洗脱物的抑菌消炎活性发现,水洗脱物、20%和50%乙醇洗脱物的抑菌率不超过50%,对IL-8和IL-6的清除率不超过30%,其抗菌消炎活性较差;95%乙醇洗脱物对***的抑制率和IL-8、IL-6的清除率均超过90%,抗菌消炎效果突出,说明选用安博莱特树脂并用乙醇梯度洗脱,将荷叶中的活性成分集中到了95%乙醇洗脱物中,达到了对荷叶提取物进行粗分离的效果。将95%乙醇洗脱物按照溶解性分成了甲醇和硅胶组,使用硅胶色谱柱进行精分离后,各组分在抗菌和消炎上表现出差异,氯仿组的抗菌效果较好,甲醇组的消炎效果较好;极性小和极性中等的组份表现出良好的抗菌效果,极性中等及极性大的组份对IL-8的清除效果较好,极性很小及极性中等的组份对IL-6的清除效果较好,这说明荷叶中的抗菌、消炎物质来自不同的物质,且消炎机制各有不同。极性中等的组份中可能含有兼具抗菌、消炎效果的物质。对极性居中的组份进行进一步纯化后获得了一个单体物质A,该物质兼具良好的抗菌消炎活性,对***、A.a、P.g和Candida的MIC50均不超过5mg/ml,最低抑菌浓度为0.04mg/ml,最低消炎浓度为0.2mg/ml。单体物质A通过1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMQC、紫外光谱、红外光谱、质谱等波谱分析后,鉴定为观音莲明,属首次自荷叶中分离。

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