GSH耗竭在芹菜素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡中的作用

作     者：帅卫 

作者单位：南华大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄秋林

授予年度：2011年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：胰腺癌 芹菜素 细胞凋亡 谷胱甘肽 

摘      要：目的 研究芹菜素（apigenin,API）诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡作用，并探讨细胞内谷胱甘肽（glutathione, GSH）耗竭是否参与其诱导细胞凋亡作用。 方法 不同浓度API（20.0、40.0、80.0μmol/L）处理体外培养胰腺癌PANC-1细胞。碘化丙啶（propidium iodide, PI）染色流式细胞术（flow cytometry, FCM）分析细胞凋亡率;酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定细胞组蛋白/DNA碎片水平。Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态改变。分光光度法测定细胞内GSH含量。 结果 PI染色FCM结果表明，API（20.0、40.0、80.0μmol/L）孵育24h，胰腺癌PANC-1细胞凋亡率逐次增加（P0.05），呈剂量依赖性。ELISA测定结果显示，API（20.0、40.0、80.0μmol/L）显著诱导胰腺癌PANC-1细胞组蛋白/DNA碎片增加（P0.05）。Hoechst33258染色荧光显微镜观察发现API（20.0、40.0、80.0μmol/L）导致胰腺癌PANC-1细胞的典型凋亡形态学变化，例如细胞核固缩、核碎裂等;同时，细胞凋亡指数以浓度依赖方式增高（P0.05）。分光光度法测定结果证明，API（20.0、40.0、80.0μmol/L）作用3h,胰腺癌PANC-1细胞内GSH含量随药物浓度增高逐次降低（P0.05）。此外，外源性GSH预孵育能对抗API诱导PANC-1细胞GSH耗竭作用;并能有效阻断API诱导细胞凋亡率和组蛋白/DNA碎片增加效应。 结论 1. API具有诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡作用，呈浓度依耐性。 2. API诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡与其耗竭细胞内GSH相关。