蛋白酶激活受体、IL-8在前列腺癌细胞株中表达的意义

作     者：王晓朦 

作者单位：昆明医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：申吉泓

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：前列腺癌 蛋白酶激活受体 PAR激动剂 白介素-8 

摘      要：目的： 观察蛋白酶激活受体PAR1,2,4与白细胞介素-8在不同前列腺癌细胞株的表达及作用,探索前列腺癌的分子病理机制。方法： 1、体外培养前列腺上皮细胞株HPrEpiC、雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCaP、雄激素非依赖性前列腺癌细胞株DU145、PC-3,并检测PAR1、PAR2,、PAR4,IL-8基因及蛋白的表达。 2、将细胞分组,分别以未加入激动剂0h及加入PAR1(20umol/L),PAR2(150umol/L), PAR4(300umol/L)激动剂后12h,24h,48h提取细胞,用MTT方法检测前列腺癌细胞增殖能力;3、将细胞分组,分别加入PAR1(20umol/L), PAR2(150umol/L), PAR4(300umol/L)的激动剂,分未加入激动剂0h及加入激动剂后12h,24h,48h提取细胞,用Real-time PCR、Western blotting技术检测蛋白酶激活受体PAR1、PAR2、PAR4及IL-8的表达变化,探讨蛋白酶激活受体的激活与IL-8升高的密切关系。 结果： 1、与前列腺上皮细胞相比,前列腺癌细胞(LNcap细胞、PC-3细胞、DU145细胞)中工L-8基因及蛋白表达明显升高(P0.05);同等条件下,三种前列腺癌细胞(LNcap细胞、PC-3细胞、DU145细胞)增殖能力无明显差异(P0.05);3、Real-time, western-blot检测结果提示：PAR1、PAR2、PAR4激动剂可以激活前列腺癌细胞(LNcap细胞、PC-3细胞、DU145细胞)及前列腺上皮细胞HPrEpiC中对应的PAR受体;被激活蛋白酶激活受体的前列腺癌细胞IL-8表达量明显升高,但前列腺上皮细胞HPrEpiC中IL-8变化不明显(P0.05);雄激素非依赖性前列腺癌DU145、PC-3细胞中PAR和IL-8的表达要高于雄激素依赖性前列腺癌LNcap细胞。 结论： 1、前列腺癌细胞(LNcap细胞、PC-3细胞、DU145细胞)和前列腺上皮细胞HPrEpiC中均有PAR1、PAR2、PAR4及IL-8基因及蛋白的表达;前列腺癌细胞中PAR及IL-8基因及蛋白表达要高于前列腺上皮细胞;非激素依赖性前列腺癌细胞中PAR及IL-8基因及蛋白表达要高于激素依赖性前列腺癌;2、IL-8的含量与前列腺癌(LNcap细胞、PC-3细胞、DU145细胞)细胞的增殖能力有正相关性。 3、蛋白酶激活受体的升高可激活前列腺癌细胞(LNcap细胞、PC-3细胞、DU145细胞)的增殖能力,同等增殖能力下,非激素依赖性前列腺癌(PC-3细胞、DU145细胞)中IL-8基因及蛋白的表达更高。 4、蛋白酶激活受体可能会成为前列腺癌药物治疗的新靶点。