热休克蛋白90α对食管癌细胞侵袭转移能力的影响

作     者：郭雨 

作者单位：新疆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张志强

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：食管癌 HSP90α 侵袭转移 RNA干扰 

摘      要：目的：探讨HSP90α在食管癌细胞侵袭转移中的作用机制。方法：使用细胞转染技术将siRNA-HSP90α转染入CE81T-4细胞中,并分为实验组、阴性对照组、空白对照组;并用RT-PCR和Western blot检测3组细胞中HSP90αmRNA水平和蛋白质水平的表达差异,验证是否转染成功。MTT法检测3组细胞的增值活力,流式细胞术分析细胞周期、凋亡的改变,划痕实验和Transwell体外侵袭实验检测转染后CE81T-4细胞迁移和侵袭的变化。结果：在siRNA-HSP90α成功转染CE81T-4细胞后,RT-PCR检测3组结果显示,实验组中HSP90αmRNA水平表达量显著低于空白对照组和阴性对照组(P 0.05, P 0.05)。Western blot分析显示实验组HSP90α蛋白表达量降低,与空白对照组和阴性组相比差异有统计学意义(P0.05,P0.05)。MTT实验结果显示,实验组细胞的增殖能力明显减弱,与其他两组比较差异具有统计学意义(P0.05,P0.05)。HSP90a基因表达沉默后,细胞凋亡率为32.67%,较空白对照组和阴性对照组明显增加(P0.05,P0.05)。实验组细胞周期被阻滞在G0/G1期。Transwell体外侵袭实验显示实验组侵袭迁移的细胞个数为(76.4±8.7),显著低于空白照组(140.3±5.8,P0.05)与阴性对照组(129.3±10.1,P0.05)。划痕实验结果显示,72h后实验组细胞的迁移力较其他两组明显降低。结论：HSP90a的下调会降低食管癌细胞的转移侵袭能力。