兰寿、皇冠珍珠金鱼及其杂交子一代鳞片组织学、生化成分的比较研究

作     者：谢松 

作者单位：上海海洋大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈再忠;高建忠

授予年度：2014年

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

主      题：金鱼 鳞片 杂交 组织学 生化成分 

摘      要：本文以兰寿金鱼（Ranchu Goldfish）和皇冠珍珠金鱼（Crown Pearl-scaleGoldfish）为研究对象，研究了兰寿、皇冠珍珠金鱼及其杂交子代鳞片的组织结构、生化成分，遗传规律。为珍珠鳞金鱼种质标准、金鱼系统演化及硬骨鱼类鳞片进化提供了基础生物学依据。 （1）本文采用石蜡切片法，对兰寿和皇冠珍珠金鱼鳞片进行H E常规染色，采用硝酸银法（根据Von Kossa）、Mallory三色法等对鳞片中的钙盐（羟基磷灰石）和胶原纤维进行特殊染色。研究结果表明：外部形态方面，皇冠珍珠鳞片与同龄兰寿鳞片相比，基区到顶区长度为同龄的兰寿鳞片1/2左右，上下侧区减小为兰寿鳞片的5/8，上下侧区的长度大于基区到顶区的长度;皇冠珍珠鳞片表面上下侧区不明显，只有基区和顶区能够明显区分，顶区及部分上下侧区明显突起，没有明显鳞沟。显微观察结果：皇冠珍珠与兰寿相比，相邻两个鳞片之间只重叠很少一部分。鳞片由鳞囊包裹后包被一层表皮，大部分露出在体外。皇冠珍珠鳞片边缘到中央的厚度逐渐增加，皇冠珍珠比兰寿鳞片中央部分明显增厚;皇冠珍珠鳞片纤维层中没有羟基磷灰石的沉积，其鳞片的变异不是骨质层的增加;皇冠珍珠鳞片纤维层中胶原纤维排列比兰寿鳞片疏松且无规则，纤维层中充满了疏松结缔组织基质和大量成纤维细胞、少量巨噬细胞等疏松结缔组织细胞，这在国内外研究中属首次发现;鳞片底部有骨针细胞存在。 （2）本文采用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）、羟脯氨酸碱水解法对兰寿和皇冠珍珠金鱼鳞片中的Ca、P和羟脯氨酸进行测定。结果表明：皇冠珍珠金鱼鳞片中Ca和P含量极显著低于兰寿金鱼鳞片。皇冠珍珠与兰寿相比，羟基磷灰石的含量极其显著地降低。组织学研究证明皇冠珍珠鳞骨质层与兰寿鳞片相比没有明显的增加和减少，鳞片中纤维层明显增厚且其中充满了疏松结缔组织，羟基磷灰石在皇冠珍珠鳞片中的含量改变可能是由于鳞片下层纤维层的增多造成的。两种金鱼鳞片中羟脯氨酸的含量没有差异。皇冠珍珠鳞片中胶原蛋白含量与兰寿鳞片相比没有改变。鳞片变异之后，纤维层增厚，鳞片中胶原纤维的含量并没有改变。组织学研究证明皇冠珍珠鳞片下层明显增厚且其中充满了疏松结缔组织，其中的胶原纤维的含量保持稳定，说明在珍珠鳞片增厚的同时，其纤维层的胶原纤维也在生长。 （3）本文采用品种间杂交的方法，研究了兰寿、皇冠珍珠金鱼杂交子一代鳞片的鳞片表型、组织学和生化成分特点。结果表明：杂交子一代鳞片99%为正常鳞，兰寿和皇冠珍珠金鱼杂交子一代组织学分析结果显示：正反交子一代鳞片下层胶原纤维呈平行排列，正交和反交子代鳞片中均未发现有疏松结缔组组织基质和细胞存在。与皇冠珍珠鳞片组织学相比，杂交子一代鳞片没有增厚，纤维层中均没有发现疏松结缔组织基质和细胞。与兰寿组织学结构、成分分布一样，为正常骨鳞。杂交子一代鳞片在组织学水平（排列、结构和组成）上没有差异。珍珠鳞对正常鳞为隐性性状。杂交子一代鳞片的生化成分研究结果表明：以皇冠珍珠为母本，兰寿父本的正交子一代鳞片中胶原纤维与羟基磷灰石含量的比值与母本皇冠珍珠最接近。杂交子一代鳞片的表现在组织形态上没有差异，只是在生化成分上有改变。以皇冠珍珠为母本的情况下，更有利于子代鳞片中胶原纤维的表达。