麦冬总皂苷酶解产物分离提取的研究
作者单位:大连工业大学
学位级别:硕士
导师姓名:鱼红闪
授予年度:2008年
学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 10[医学]
摘 要:本文主要研究了生物酶法提取麦冬总皂苷的工艺条件,以及对麦冬总皂苷酶解产物的纯化与分离进行了研究。本文取Absida sp.O8s菌做为产酶的最佳菌种,通过对生物酶法提取麦冬总皂苷的研究,确定生物酶法提取麦冬总皂苷的最佳工艺为:5g麦冬粉末用40mL 0.02mol/LpH6.0磷酸盐缓冲液浸泡4h,加入40mL粗酶液,在温度为50℃条件下,pH6.0时经过酶反应12h后,在室温下加入3倍体积95%乙醇,在40℃或45℃静置4h,过滤,滤液蒸发至无醇味,残余液加入蒸馏水定容至100mL。酶解产物采用AB-8型大孔吸附树脂纯化。测定了 AB-8树脂的吸附容量为53.16 mg/mL,确定了洗脱剂为80%的乙醇溶液,用80%的乙醇将树脂柱中的皂苷类物质洗脱下来,收集洗脱液,与流出液合并,浓缩,干燥,回收率为85.49%。AB-8型大孔吸附树脂纯化所得麦冬总皂苷经硅胶柱分离,收集分离所得的麦冬皂苷,经HPLC检测,结果表明:以V(氯仿):V(甲醇)的不同配比进行洗脱,洗脱出七种麦冬皂苷组分;以V(氯仿):V(甲醇)=9.7:0.3为洗脱剂可以洗脱出标号为E的麦冬皂苷组分,经HPLC检测,标号为E的组分中主要含有麦冬皂苷C,其纯度为70.8%。