牦牛朊蛋白基因（Prnp）两个位点的多态性与疯牛病易感性的关系研究

作     者：王荔华 

作者单位：西北农林科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：胡建宏

授予年度：2013年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：牦牛 朊蛋白 易感性 Prnp基因表达水平 

摘      要：朊蛋白基因（Prnp）编码朊蛋白，是引起疯牛病的主效基因。为研究牦牛疯牛病的易感性与Prnp基因多态性的相关性，本文以288头牦牛为研究对象，鉴定牦牛的Prnp启动子23bp插入/缺失和第一内含子12bp插入/缺失多态，统计分析牦牛与各国已报道的牛23bp和12bp插入/缺失数据;并采用SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法对79头牦牛延髓组织中Prnp基因的mRNA表达水平进行了测定，并对不同单倍型、年龄、公母和毛色间的表达量进行了方差分析。结果表明： 1.对牦牛Prnp基因23bp和12bp两个插入/缺失位点进行了鉴定和分析，得到牦牛23bp和12bp两个插入/缺失（I/D）位点的基因频率和基因型频率。其中，牦牛23bp插入-插入、插入-缺失和缺失-缺失基因型的频率分别为0.027、0.113和0.86，其插入和缺失等位基因的频率分别为0.133和0.867;12bp插入-插入、插入-缺失和缺失-缺失基因型的频率分别为0.627、0.355和0.018，其插入和缺失等位基因的频率分别为为0.804和0.196。与世界各国已报道的数据进行比较分析，牦牛12bp多态位点均具有较高的插入频率，而牦牛23bp多态位点具有极低的插入频率。 2.构建了牦牛Prnp基因23bp和12bp插入/缺失位点组成的单倍型。牦牛以23缺失12插入单倍型（23D12I）为主，该单倍型频率为0.692。 3.牦牛Prnp基因的相对表达量（延髓组织）在不同基因型中差异显著（P0.05）。 本研究结果表明，牦牛朊蛋白基因23bp与12bp位点的插入与缺失影响该基因的相对表达，与资料数据相比较，这两个位点的突变影响牦牛疯牛病的易感性。