麻黄类药对组成规律的基础研究——麻黄—白术药对的血浆药动学、组织分布及排泄研究

作     者：朱钊铭 

作者单位：南方医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：罗佳波

授予年度：2014年

学科分类：100504[医学-方剂学] 1005[医学-中医学] 10[医学] 

主      题：麻黄-白术 药对 大鼠 血浆药动学 组织分布 排泄研究 

摘      要：研究背景与意义 “药对专指临床上常用且相对固定的两味中药配伍形式,是中药复方配伍中最简单、最常见的用药形式。其配伍符合中医“七情合和理论之法度,具备复方的基本主治功能,为中医遣方用药特色之一,具有紧扣病机、功用专一、疗效确切等特点。 “药有个性之特长,方有合群之妙用,中药通过配伍组成方剂,或可以提高与改变疗效,或可以降低毒性与副作用,以适应复杂多变的病情。而中药复方配伍规律研究,是目前亟待解决的技术难题,从复方最小单位“药对入手研究配伍规律,从易到难的研究思路,是复方研究的基础所在。 麻黄-白术药对出自张仲景《金匮要略》中的“麻黄加术汤,方中君药麻黄与白术(3：4)。功效：发汗解表,散寒除湿。主治：外感寒湿,恶寒发热,身体烦疼,无汗不渴,苔白腻,脉浮紧者。目前主要集中于类风湿性关节炎的研究。 麻黄加术汤属于麻黄汤经方,麻黄白术药对组成规律遵循中医药“理法方药治则。其理在于寒郁肌腠、湿滞筋骨、表阳被遏、营卫不通;其法为微汗法,既有发越阳之功,又有散寒除湿之能;药味组成包括麻黄(9g)、桂枝(6g)、炙甘草(3g)、杏仁(9g)、白术(12g)。目的 结合前期麻黄-白术药对主要化学成分、药理效应及尿液代谢物研究工作基础,本课题以“麻黄加术汤核心组成麻黄-白术药对为切入点,进行麻黄-白术配伍前后主要效应成分(麻黄类生物碱、白术内酯)的血浆药动学、组织分布和排泄研究,探讨麻黄-白术药对配伍规律,为药对配伍提供实验依据。 方法 1.麻黄-白术药对血浆药动学研究 分别建立UPLC-MS/MS法,定量分析大鼠血浆中麻黄类生物碱(NME、 NMP、E、PE、ME)与白术内酯(AO-Ⅰ、AO-Ⅱ、AO-Ⅲ),完成方法学考察(基质效应、提取回收率、标准曲线、准确度与精密度、稳定性),应用于血浆药动学研究。采用SD大鼠,随机分为麻黄组、白术组、麻黄-白术(3：4)组。于给药后Omin、5min、15min、30min、45min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h、48h,眼底静脉丛采血,血样预处理后进样分析,绘制药-时曲线图,并比较主要药动学参数。 2.麻黄-白术药对组织分布研究 建立UPLC-MS/MS法,测定大鼠组织中主要效应成分的含量。于给药后0.5h、1h、4h、8h、2h,取组织肝、心、脾、肺、肾和脑,将样品预处理后进样分析,并制作组织分布特征图。3.麻黄-白术药对排泄研究 建立UPLC-MS/MS法,定量分析大鼠排泄物粪便和尿液中主要效应成分。于给药后0-2h、2-4h、4-6h、6-8h、8-12h、12-24h、24-36h,采集粪便,于给药后0-2h、2-4h、4-6h、6-8h、8-12h、12-24h、24-36h,分别采集尿液,样品预处理后进样分析,计算排泄物的总排泄率,并制作排泄物浓度分布特征图。 4.数据统计的分析 数据采集使用Agilent Mass Hunster Data Acquisition(Agilent ***);药动学参数分析使用DAS3.2.2软件,组织分布特征图、排泄物浓度分布特征图使用EXCEL作图软件;统计学分析使用SPSS13.0软件。 结果 所建立的定量分析方法均准确度良好,重现性好,可适用于测定大鼠血浆中、组织中和排泄物中麻黄类生物碱和白术内酯的含量。 1.血浆药动学 1.1麻黄与麻黄-白术(3：4)组 1.1.1麻黄类生物碱的药-时曲线 麻黄组与麻黄白术组NME、NMP、E、PE、ME吸收入血较快,5min即可检出,24h后低于检测限。配伍白术后,NME、NMP、E、PE、ME的Cmax均降低,且NME、NMP、E均出现双峰现象,其中E成分尤为明显。 1.1.2药动学参数 与麻黄组相比,麻黄-白术组NMP与PE的Tmax提前至0.75h,具有显著性差异(p0.05);麻黄生物碱的Cmax均降低,但无显著性差异(p0.05);t1/2、AUC均升高,具有显著性差异(p0.05);Tmax、t1/2、CL、V均升高,具有显著性差异(p0.05)。 2.组织分布 2.1麻黄与麻黄-白术(3：4)组 2.1.1麻黄类生物碱的组织分布特征 麻黄组与麻黄白术组中麻黄类生物碱在肺脏中分布浓度最高,配伍增加麻黄生物碱在肺脏、脾