植物内生真菌HCCB05974和HCCB06030次级代谢产物的分离纯化

作     者：刘崇玉 

作者单位：上海交通大学 

学位级别：硕士

导师姓名：钱秀萍

授予年度：2012年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：植物内生菌 刺盘孢属 链格孢属 次级代谢产物 抗肿瘤细胞活性 

摘      要：植物内生真菌丰富多样的次级代谢产物是人们寻找新型抗菌、抗肿瘤天然药物的重要资源。本论文通过对植物内生真菌代谢物抗乳腺癌细胞(MDA)、肺癌细胞(A549)和胰腺癌细胞(PANC1)的活性筛选,以抗胰腺癌细胞活性较高的菌株为研究对象,进行了菌种鉴定和次级代谢产物的分离纯化、结构鉴定和活性检测,为深入研究提供有益的参考。 本论文采用MTT法筛选了192株植物内生真菌的抗肿瘤细胞活性,88株植物内生真菌代谢物的肿瘤细胞生长抑制率在50%以上,其中2株内生真菌HCCB05974和HCCB06030具有较高的抗胰腺癌细胞活性。通过对HCCB05974和HCCB06030菌株的菌落形态、培养特征和ITS序列分析,分别归类为刺盘孢属和链格孢属。采用石油醚萃取、减压硅胶柱层析、HPLC制备等方法对菌株HCCB05974和HCCB06030的次级代谢产物进行分离纯化,并利用质谱和1H-NMR等相关波谱对化合物进行结构解析。HCCB05974来源的5个化合物鉴定为Nectriapyrone、3-吲哚甲酸乙酯、苯乙酸、对羟基苯乙酸和吲哚-3-乙酸乙酯,HCCB06030来源的6个化合物鉴定为Solaniol、dl-aloesol、Alternariol、Isoaltenuene、Altenuene和交链孢霉甲基醚。考察这些化合物对乳腺癌细胞(MDA)、肺癌细胞(A549)和胰腺癌细胞(PANC1)的活性,结果表明来源于刺盘孢属HCCB05974内生真菌的吲哚-3-乙酸乙酯具有弱抗肿瘤活性。