小鼠胚胎培养液中H2O2浓度与胚胎体外发育的相关研究

作     者：曹新燕 

作者单位：延边大学 

学位级别：硕士

导师姓名：方南洙;朴凤玉

授予年度：2006年

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主      题：体外发育率 胚胎培养液 H2O2含量 

摘      要：近年来，对哺乳动物体外受精及胚胎发育的研究日益深入。这些研究的一个重要基础就是胚胎的早期培养。因此，建立稳定，可靠的哺乳动物(包括人类)胚胎体外培养系统，已成为当前这一领域里的重要研究课题之一。然而，哺乳动物胚胎体外培养过程中，常发生体外发育阻断现象，胚胎体外发育阻断的机理尚未清楚，胚胎体内发育和体外培养的主要环境差别是氧浓度的不同，体外发育的胚胎周围环境氧浓度显著升高，而氧气在代谢过程中，产生毒性副产物-ROS，近年来，有关ROS对早期胚胎体外发育的影响已有大量报道。 本课题以昆明小鼠为研究对象，通过测定胚胎培养液中的HO含量来探讨ROS对早期胚胎体外发育的影响，为提高家畜胚胎体外培养效率提供可靠的理论依据。 从超数排卵处理的小鼠输卵管中收集1-细胞期胚胎并在体外进行培养，以mCZB培养液为基础培养液，应用紫外可见分光光度法，分别在胚胎发育不同时间间隔、胚胎体外培养0～36h，测定胚胎培养液中HO浓度，探讨胚胎体外发育率与胚胎培养液中HO浓度的关系。 胚胎体外培养0～24h、24～48h、48～72h、72～96h培养液中HO浓度分别为3.379μM、2.071μM、1.218μM、0.891μM。0～24h HO浓度显著高于其它组，其它三组之间差异不显著;胚胎体外培养36h胚胎培养液中HO浓度越高，胚胎体外培养的囊胚发育率越低，呈现负相关关系，相关系数r=-0.784。 通过分析得出结论：2-细胞末期胚胎培养液中HO浓度最高;胚胎体外发育0～36h，胚胎培养液中HO浓度对小鼠胚胎以后的发育具有重要影响。