艾灸配合化纤Ⅳ号方影响博莱霉素所致肺纤维化大鼠Collagen Type Ⅲ和PDGF的研究
作者单位:成都中医药大学
学位级别:硕士
导师姓名:李戎
授予年度:2014年
学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
主 题:肺纤维化 艾灸 化纤Ⅳ号方 Collagen TypeⅢ PDGF
摘 要:目的:通过观察艾灸配合化纤Ⅳ号方治疗博莱霉素诱导肺纤维化大鼠Collagen Type Ⅲ和PDGF的变化,探讨艾灸配合化纤Ⅳ号方的治疗效应及其机制,为中医治疗肺纤维化进一步提供实验依据。 方法:采购于成都中医药大学动物实验中心,鼠龄约为6周的SD大鼠,SPF级,雌雄各半,体重200g±20g,批号20130101。随机分为空白组、模型组、化纤Ⅳ号方组、艾灸组、化纤Ⅳ号方与艾灸配合治疗组(简称为“灸药组),其中空白组10只,其余各组每组30只。饲养、造模与治疗在成都中医药大学针灸推拿学院国家局重点实验室进行。中药购买于成都中医药大学附属医院。化纤Ⅳ号方(红花、丝瓜络等)中药的熬制都统一在蓉乐大药房进行,熬制好的同一批中药统一冰冻在实验室4度冰箱中,确保每次用药都统一。灌胃针采用16号大鼠灌胃针。 造模除了空白组,其余四组均采用大鼠气管内一次性注射博莱霉素(标准原液zeocin博莱霉素125mg/支),用时以无菌0.9%NaCl溶液稀释成4mg/ml的溶液,用1ml注射器抽取定量的博莱霉素稀释液5mg/kg注射入实验动物气管内,立即通过直立旋转等手段,使药物均匀分布于其肺组织。实验期间动物均自由饮水和进食。记录大鼠体重和各项功能后,各组动物在7,14,30天后处死,取肺组织进行HE染色,分别观察其肺组织病理改变,并检测其Collagen TypeⅢ、PDGF的基因和蛋白表达情况。 结果:实时荧光定量结果显示:与空白组相比,各组Ⅲ-C和PDGF的表达增高(P0.05)。与模型组相比,各实验组的Ⅲ-C和PDGF的表达有明显降低(P0.01)。而各实验组中,灸药组的治疗方法效果最明显,Ⅲ-C和PDGF的表达最低。蛋白免疫印迹法检测结果显示:与模型组相比各组的Ⅲ-C蛋白表达有差异。 结论:1、通过艾灸治疗可减轻博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的肺纤维化程度。2、化纤Ⅳ号方可以减轻博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的肺纤维化程度。3、艾灸配合化纤Ⅳ号方阻抑肺纤维化的效果优于单用艾灸或单用化纤Ⅳ号方。4、艾灸、化纤Ⅳ号方及其二者配合使用不同程度阻抑博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺纤维化进程,可能通过调控其Ⅲ-C和PDGF来实现。