辅酶Q10对黑质多巴胺能神经元的早期作用及其机制研究

作     者：伏兵 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：董万利

授予年度：2008年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：脑片 帕金森病 辅酶Q10 1-甲基-4-苯基吡啶离子 酪氨酸羟化酶 

摘      要：目的: 1.探讨乳鼠中脑黑质器官型脑片的培养方法。 2.证实乳鼠中脑黑质器官型脑片培养是研究帕金森病病因和机制的良好方法。 3.探讨辅酶Q10对离体帕金森模型的黑质多巴胺能神经元的作用及其机制,为Parkinson病的治疗提供帮助。 方法: 1.选SD乳鼠,制备中脑黑质器官型脑片(厚度350μm)。用Millicell-CM微孔膜脑片离体培养技术培养脑片,光镜观察,TH免疫组化反应染色,并与同龄SD乳鼠作形态学及TH阳性反应细胞计数比较。 2.12只SD乳鼠分成4组,每只乳鼠切取4张脑片,脑片分别于对照组、含MPP+、CoQ10及MPP+ +CoQ10的培养液中共孵育48h。 3.用抗酪氨酸羟化酶免疫组织化学方法观测黑质阳性细胞体及突起的变化。 结果: 1.培养0～14d内器官型脑片黑质细胞的体积及细胞密集程度均小于同期在体发育的黑质结构;离体培养与同期在体发育的黑质结构比较,TH阳性细胞相对幼稚,细胞间连接出现较晚,两者TH阳性细胞计数存在统计学意义(P0.05),有突起的阳性细胞的比例与对照组比较有统计学意义(P0.05)。 ***10单独不影响多巴胺能神经元,CoQ10+MPP+组TH阳性细胞形态完整,突起明显,多而长,与MPP+组比较有统计学意义(P0.05)。 结论: 1.离体培养的黑质脑片与在体生长的黑质结构的发育过程近似,但离体培养的黑质脑片发育滞后于在体发育的黑质结构。 2.乳鼠中脑黑质器官型脑片培养是研究帕金森病发病机制的良好方法。 3.辅酶Q10能阻止MPP+引起的多巴胺能神经元的变性,对多巴胺能神经元起到保护作用。