东北虎林园猫科动物体内寄生虫感染调查与研究

作     者：刘建丽 

作者单位：东北林业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：华育平

授予年度：2007年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：体内寄生虫 感染调查 等孢球虫 蛔虫 猫科动物 

摘      要：由于自然生态环境的破坏及食物的匮乏，野生东北虎等多种猫科动物处于濒危的境地。随着人工养殖技术的不断提高，东北虎、狮、豹等猫科动物种群数量在慢慢扩大。但各种动物疾病也随之成为人工养殖猫科动物的一个重要问题。体内寄生虫更由于其感染率和感染强度都很高，长期以来对猫科动物造成严重危害。针对这一情况，作者对东北虎林园多种猫科动物的寄生虫感染情况进行调查和研究。 2006年1月18日和7月25日两次分别对从哈尔滨东北虎林园采集的65份和84份多种猫科动物的粪样进行漂浮检查，结果粪样中存在三种虫卵，分别为猫弓首蛔虫(Toxocara cati)卵、狮弓蛔虫(Toxascaris leonine)卵和一种等孢属(Isospora)球虫卵。且蛔虫和等孢属球虫感染率分别为，第一次：蛔虫感染率为50.77％(33／65);等孢球虫感染率为56.92％(37／65);第二次：蛔虫感染率为53.71％(45／84);等孢球虫感染率为8.33％(7／84)。等孢球虫感染率1月份明显高于7月份，而蛔虫感染率1月份和7月份无显著差异。幼龄动物与成年动物蛔虫的感染率比较，1月份无显著差异，但7月份幼龄动物明显高于成年动物，分别为100％和50.63％。对十份蛔虫感染率高的粪样进行观察计数，结果表明，蛔虫感染中以狮弓蛔虫和猫弓首蛔虫混合感染居多，且平均感染强度狮弓蛔虫(18.3±20.9)高于猫弓首蛔虫)(6.3±7.97)。另外，肠解剖发现狮弓蛔虫和猫弓首蛔虫两种虫体。 分别设计合成了针对等孢属球虫和弓形虫18S rDNA序列的特异性PCR引物，提取粪便样品DNA进行PCR扩增，结果显示在含有球虫的粪便样品中均获得了等孢属球虫18S rDNA阳性扩增产物，而弓形虫18S rDNA扩增结果全部为阴性。 应用DNAStar软件，将扩增的长为1777bp的序列与Genbank中发表的17种球虫的相应的18S rDNA序列进行同源性比较，序列分析显示东北虎源球虫与其它17种球虫相应序列同源性为70.0％～99.7％之间，其中与等孢球虫的同源性为94.3％～99.7％，与弓形虫的同源性为95.2％，并单独聚为一类，有可能为一新种。综合对东北虎源球虫形态学观察、PCR反应结果、18S rDNA序列的系统进化分析，确定东北虎源球虫为等孢属球虫。本次调查在国内首次发现虎、狮、豹、猞猁等猫科动物可以感染等孢球虫。 通过对东北虎源等孢球虫18S rDNA序列进行系统发育分析，发现该等孢属球虫同肉孢子属球虫及其它等孢属球虫单独聚为一类，与肉孢子属球虫的亲缘关系要比与艾美尔属球虫的亲缘关系更近。这一结果对“将等孢属球虫归到肉孢子科中，而不是艾美尔科提法给予了进一步的认同和支持。